[发明专利]一种磷脂酰生育酚的制备方法

权利要求书

1.一种磷脂酰生育酚的制备方法，其特征是大豆混合磷脂溶于无水的有机溶剂中，加入生育酚，在经处理的花生磷脂酶D催化下进行碱基交换反应，混合磷脂转化为磷脂酰生育酚，反应物通过水洗有机相，经脱水脱溶后，用丙酮充分洗涤，分离出丙酮不溶物，干燥得产品，经过HPLC测定，产品磷脂酰生育酚的含量大于55％，而且产品中不含有溶血磷脂和磷脂酸；

酶促反应的工艺条件为：有机溶剂∶混合磷脂∶生育酚∶经处理的花生磷脂酶D的v/w/w/w比为5-20∶0.5-2∶1-10∶0.025-0.25，反应温度20℃-50℃，反应时间为24-48小时。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是所用有机溶剂为乙醚，氯仿。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是花生磷脂酶D在使用前进行了预处理，取2.72g磷酸二氢钾溶于100mL去离子水中，加入少量磷酸氢二钠，调节pH至5.6，配制得磷酸缓冲液；取1g花生磷脂酶D溶于80mL磷酸缓冲液中，得到pH 5.6的花生磷脂酶D酶液，加入49克氯化钾并溶解，完全冷冻后于真空度70Pa，温度-40℃条件下冻干48小时，得到经处理的花生磷脂酶D。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是经处理的花生磷脂酶D的酶促反应是在无水的环境中进行的。