[发明专利]一种完全利用木质纤维素生产富马酸的方法

权利要求书

1.一种将木质纤维素的降解液完全利用于微生物发酵生产富马酸的方法，其特征在于以两步法降解木质纤维素步骤得到的两步降解液为原料，将降解半纤维素得到的木糖溶液配制成种子培养基用于种子培养步骤的同时，再将降解纤维素的产物葡萄糖溶液配制成发酵产酸培养基用于发酵产富马酸步骤，实现完全利用木质纤维素发酵生产富马酸的目的。

2.根据权利要求1所述的两步法降解木质纤维素的方法，其特征在于首先降解木质纤维素中的半纤维素得到木糖以供种子培养步骤，再降解木质纤维素中的纤维素得到葡萄糖以供发酵产富马酸步骤。

3.根据权利要求1所述的配制种子培养基的步骤，其特征在于称量一定量的半纤维素降解液稀释或浓缩成浓度为10～40g/L的木糖溶液，加入种子培养必需的营养物质，配制成种子培养基，将种子培养基在115～121℃的高温下灭菌15～30分钟，冷却。

4.根据权利要求3所述的配制种子培养基的步骤，其特征在于加入的种子培养必需的营养物质为(NH₄)₂SO₄1.5～3g/L，酵母膏0～4g/L，玉米浆0～5mL/L，KH₂PO₄0.1～1g/L，MgSO₄·7H₂O 0.1～1g/L，ZnSO₄·7H₂O 0.01～0.1g/L，FeSO₄·7H₂O 0.01～0.1g/L，琼脂0～3g/L，添加中和剂控制pH为4～6.5。

5.根据权利要求4所述的配制种子培养基的步骤，其特征在于所添加的中和剂为H₂SO₄或HCl。

6.根据权利要求1所述的种子培养步骤，其特征在于按照1％～5％的接种量接入配置好的霉菌孢子悬浮液，置于温度为30～35℃，培养18～42小时后的种子液备用以发酵产富马酸。

7.根据权利要求1所述的配制发酵产酸培养基的步骤，其特征在于将降解纤维素后得到的葡萄糖降解液浓缩至80～120g/L，加入霉菌种子液发酵产酸必需的营养物质，配制成发酵产酸培养基，将发酵产酸培养基在115～121℃的高温下灭菌15～30分钟，冷却。

8.根据权利要求7所述的配制发酵产酸培养基的步骤，其特征在于加入的发酵产酸培养基所需要的营养物质为(NH₄)₂SO₄0～3g/L，酵母膏0～1g/L，KH₂PO₄0.1～1.0g/L，MgSO₄·7H₂O 0.1～1.0g/L，ZnSO₄·7H₂O 0.01～0.1g/L，FeSO₄·7H₂O 0.01～0.1g/L，通过向培养基中添加中和剂控制pH为3.0～6.0。

9.根据权利要求8所述的配制发酵产酸培养基的步骤，其特征在于所添加的中和剂为CaCO₃、Ca(OH)₂、NaOH或NaHCO₃。

10.根据权利要求1所述的发酵产富马酸的步骤，其特征在于量取种子培养得到的种子液，按照10％～30％的接种量接入发酵产酸培养中，置于温度为30～35℃，发酵培养60～96小时，得到富马酸。