[发明专利]检测头孢类抗生素的免疫层析试纸条的制备方法无效
| 申请号： | 200810022032.6 | 申请日： | 2008-06-23 |
| 公开（公告）号： | CN101315364A | 公开（公告）日： | 2008-12-03 |
| 发明（设计）人： | 胥传来;谢会玲;刘丽强;晁慧楠 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | G01N33/52 | 分类号： | G01N33/52;G01N33/558 |
| 代理公司： | 无锡市大为专利商标事务所 | 代理人： | 时旭丹;刘品超 |
| 地址： | 214122江苏省无锡*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测 头孢 抗生素 免疫 层析 试纸 制备 方法 | ||
1、一种检测头孢类抗生素的免疫层析试纸条，其特征在于由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背衬组成，PVC背衬上依次粘贴样品垫、结合垫，硝酸纤维素膜，吸水垫，结合垫上包被了抗头孢类抗生素的簇特异性抗头孢类抗生素抗体-胶体金标记物，硝酸纤维素膜上依次包被有头孢氨苄-OVA检测线和羊抗兔IgG质控线。
2、权利要求1所述检测头孢类抗生素的免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于制备步骤为：
(1)制备头孢氨苄-OVA偶联物：将头孢氨苄与OVA以100∶1摩尔比溶于pH7.4、0.01mol/L PBS中，搅拌下加入戊二醛交联剂，戊二醛摩尔用量为头孢氨苄摩尔量的1/10，室温反应3h，4℃透析3天，形成头孢氨苄-OVA偶联物；
(2)制备胶体金：用柠檬酸三钠还原剂将氯金酸还原制成20nm-40nm胶体金颗粒；
(3)制备抗头孢类抗生素多克隆抗体-胶体金标记物：将3mL胶体金调至pH9，搅拌下逐滴加入蛋白浓度为0.075mg/mL的抗头孢类抗生素多克隆抗体0.2mL，放置30min后加入牛血清蛋白BSA使终浓度为1％，放置至少30min后，10000转50min离心，并用0.002mol/L、pH9.0的硼酸盐缓冲液3mL重悬两次，最后用该硼酸盐缓冲液0.3mL重悬，得到稳定的抗头孢类抗生素多克隆抗体-胶体金标记物；
(4)将抗头孢类抗生素抗体-胶体金标记物包被在胶体金结合垫上，将头孢氨苄-OVA偶联物和羊抗兔IgG分别包被在作为反应垫的硝酸纤维素膜的检测线和质控线，在37℃烘箱干燥；
(5)试纸条的组装：将样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫由一端依次黏附在PVC背衬上，即得到用于检测的免疫层析试纸条。
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