[发明专利]小麦禾谷镰刀菌茎腐病苗期接种鉴定方法

权利要求书

1.一种小麦禾谷镰刀菌茎腐病的抗性的苗期接种鉴定方法，其特征在于：

1)保存的禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)菌种在超净工作台上于PDA培养基上活化培养，3天后挑取菌丝接种在经过121℃高压灭菌的质量比0.6％绿豆汤液体培养基中，25℃条件下180转/分钟摇床振荡培养72h，过滤，调节菌液浓度至10⁵个孢子/mL获得禾谷镰刀菌悬浮液；

2)小麦种子于质量比0.1％升汞中消毒10min后用体积比75％酒精消毒5min后，再用无菌水冲洗3-4次；

3)小麦种子消毒后在培养皿中于25℃下萌发，种子萌发后播种于8×8cm营养钵中生长，营养钵中装有经过121℃高压灭菌40min的土壤，生长期温度保持昼20-25℃/夜10-15℃，小麦出苗后10天在每株幼苗茎基部距离土表0.5-1.0cm处缠绕浸湿的医用脱脂棉球；

4)在缠绕棉球内侧与小麦茎部接触处接种0.5mL浓度为10⁵个孢子/mL的禾谷镰刀菌悬浮液，接种后用双层遮阳网覆盖，并采用弥雾器，将接种幼苗置于近100％饱和的相对湿度下48h，而后去除遮阳网，幼苗正常生长管理；

5)接种35天后对小麦茎基部进行茎腐病调查，按茎腐病病重指数分为0-5级，即0＝无明显症状；1＝第一叶鞘褐枯小于叶鞘长度10％；2＝第一叶鞘褐枯占叶鞘长度11-25％；3＝第一叶鞘褐枯占叶鞘长度25-50％；4＝第二叶鞘有明显褐枯；5＝第三叶鞘有明显褐枯或全株枯死；以病情指数作为病害评价指标：

病情指数＝∑(病情级别×该级株数)/(调查总株数×最高病级)×100％

病情指数＜10％为抗病；病情指数10.01-20.0％为中抗；病情指数20.01-30.0％为中感；病情指数＞30.01％为感病。