[发明专利]具有酒精性肝损伤保护功能的嗜热链球菌grx02及其制备方法、用途

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是功能性乳酸菌的分离株及应用。

技术背景

对由酒精引起的肝损伤的保护研究，西欧国家侧重在酒精急性中毒或酒精肝病的治疗，以被动治疗方法为主；东南亚国家包括我国，大部分研究出发点以解酒、醒酒为目的，而忽视了预防、调节这一重要环节。并且进入体内的药物大多数要经过肝脏的转化。肝病患者肝功能减退，许多药物进入体内，势必增加肝脏负担。这些物质在肝中代谢又会进一步损伤肝脏，形成累积损伤过程，反而会进一步损害肝脏。

乳酸菌具有调节生理活性，预防疾病发生以及安全性极高的特点。乳酸菌的酒精性肝损伤保护作用在于其具有抗氧化活性，预防肝脏脂质过氧化，有效清除肝损伤产生的有害自由基；具有抗大肠杆菌、沙门氏菌等有害菌的生长，维持肠道菌群平衡，减少内毒素生成和吸收，有效预防肝损伤时细菌易位和降低内毒素血症的发生。

发酵乳制品的肝损伤保护作用的强弱与其所使用的乳酸菌的种类密切相关。从众多乳酸菌种筛选出适合生产肝损伤保护的菌种具有重要的意义。如将具有肝损伤保护作用的乳酸菌开发成保健食品，长期服用可预防、缓解和辅助治疗肝损伤，这种方式必将为人们所接受。在食品向天然型和功能型发展的今天，生产功能性酸乳这种产品是乳酸菌制品发展的方向之一，酒精性肝损伤保护功能性乳酸菌产品的开发有较广阔的前景，颇具有市场潜力。

发明内容

本发明目的在于为了克服前述和其它缺点，发明一种具有酒精性肝损伤保护作用的乳酸菌——嗜热链球菌grx02。

本发明保藏于2008年5月28日，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所。保藏号为CGMCC No：2525。

经试验本发明是一种功能性乳酸菌，特别在肝损伤保护方面具有功能特性，如将本发明嗜热链球菌grx02开发成保健食品，长期服用可预防、缓解和辅助治疗肝损伤。

本发明的另一目的在于发明上述嗜热链球菌grx02的制备方法：

包括以下步骤：

1)采用培养基从新疆民族传统乳制品中分离获得乳酸菌；

2)筛选出具有抗氧化活性、抗致病菌特性和破坏内毒素能力的乳酸菌；

3)通过动物实验比较从经步骤2)筛选出的乳酸菌中筛选出对酒精性肝损伤具有保护功能的乳酸菌，即为嗜热链球菌grx02。

经过以上方法获得的乳酸菌通过法国梅埃里公司API系列试剂条和16SrDNA序列测定所进行的鉴定，确定该菌株为嗜热链球菌(Streptococcusthermopilus)，鉴定准确率均超过99％。

本发明的第三目的是发明所述嗜热链球菌grx02的应用：

可用于制备具有酒精性肝损伤保护功能的食物。

还可用于制备具有酒精性肝损伤保护功能的发酵乳。

本发明提供的菌株发酵的各种产物可起到保护酒精性肝损伤的作用，该菌株发酵的牛奶，获得的经乳酸菌发酵的各种发酵乳产品、乳酸菌饮料产品等，都获得了具有不同程度的保护酒精性肝损伤的特性。

利用本发明菌株发酵脱脂牛乳或其它食品原料，经过干燥等加工处理，具有较好的稳定性和较长产品货架期，还是用于制备具有酒精性肝损伤保护功能的药物组合物的较好选择。长期服用可预防、缓解和辅助治疗肝损伤，特别适合长期大量饮酒人员，用无任何毒副作用。

附图说明

图1为嗜热链球菌grx02革兰氏染色显微观察图。

图2为嗜热链球菌grx02DNA的荧光图谱。

图3为嗜热链球菌grx0216S rDNA-PCR产物的荧光图谱。

图4为对照组小鼠的肝切片的HE染色图片(200倍)。

图5为模型组小鼠的肝切片的HE染色图片(200倍)。

图6为药物组小鼠的肝切片的HE染色图片(200倍)。

图7为乳酸菌对照C8M组小鼠的肝切片的HE染色图片(200倍)。

图8为嗜热链球菌grx02组小鼠的肝切片的HE染色图片(200倍)。

具体实施方式

本发明者试图获得新的嗜热链球菌菌株。该菌株可以发酵牛乳表现出具有肝损伤保护的功能特性——抗氧化活性、抗致病菌特性、破坏内毒素能力。

发明通过从新疆传统乳制品中分离获得的大量乳酸菌中利用研究抗氧化活性、抗致病菌特性的乳酸菌菌株。再通过细菌形态学、生理学和培养特征，并通过法国梅埃里公司API系列试剂条、菌株16SrDNA基因部分类聚序列进行分析鉴定，结果证实了本发明的菌株是嗜热链球菌grx02。

1.样品来源