[发明专利]一种优良食味水稻的育种方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种优良食味水稻的培育方法，属水稻遗传改良与生物技术应用领域。

背景技术

稻米品质作为水稻育种的重要目标之一，越来越受到育种工作者与消费者的关注。2000年以来，江苏省粳稻育种的目标从高产、优质、多抗转向优质、高产、多抗，优质成为江苏省粳稻育种的首要目标。因此，各育种单位都十分重视稻米品质的改良，注意选用优质材料作为杂交育种的亲本，在分离世代中加强对稻米品质的筛选鉴定，取得了显著成就。2000-2008年育成国标三级以上的优质粳稻新品种(组合)数逐年上升，共育成56个优质粳稻新品种(组合)。然而，这些品种在生产上的推广应用面积并不大。据统计，2006年在生产上年推广应用面积在50万亩以上的品种只有徐稻3号、武粳15、徐稻4号、宁粳1号、镇稻99、武运粳7号、武香粳14、武粳13、盐稻8号、扬辐粳7号等。相反，武育粳3号虽然品质达不到国标三级优质稻谷标准，但在生产上的推广应用面积仍然较大。究其原因，多数品种的食味品质不能满足消费者的需求是主要原因之一。分析56个品质达国标三级优质稻谷标准以上粳稻品种的品质状况可知，品质达国标一级的粳稻品种仅8个，达国标二级的粳稻品种(组合)也只有17个。尤其是食味品质欠佳，缺乏在国际市场上具有竞争力的优质品种，这已成为制约我省优质粳稻产业发展的一个主要因素。

研究表明，淀粉中直链淀粉的相对含量是决定米饭质地和食味的重要因素。直链淀粉含量低，米饭粘软，外观油润，有光泽，冷不回生，适口性好；反之，则米饭质地硬，粘性小，蓬松干燥，光泽差(Zhu C L，et al.Sci Agric Sin.2004，3(2)：81-88)。暗胚乳突变是水稻低直链淀粉突变的主要类型，携带该突变位点的水稻品种其胚乳外观呈云雾状、乳白色，透明度略差，其米饭质地粘软，表面光泽透亮，综合了糯米的柔性和粳米的弹性，冷饭不硬，食味品质极佳。

日本历来重视稻米品质，生产上推广的粳稻品种如“越光”等，无论外观品质或食味品质均堪称一绝。日本水稻育种家已利用暗胚乳突变基因育成了大量食味品质优良、直链淀粉偏低的水稻品种，如关东194、Milky Queen和New-hikari等(Sato M et al.Jpn J Breed，1996，46(supp.1)：221；Tomit K et al.Bull Fukui Agr Exp Sta Series，2007，44：1-20.)。因此，利用日本优质粳稻资源改良江苏高产粳稻的品质，是一条值得探索的途径。发明一种高效的暗胚乳突变基因的转育与选择鉴定方法，聚合抗病、优质、高产基因于一体，是本发明的宗旨。

发明内容

技术问题本发明涉及一种优良食味水稻培育方法，采用高效的暗胚乳突变基因的转育与选择鉴定方法，聚合抗病、优质、高产基因于一体，获得优良食味水稻品种。

技术方案本发明的内容是一种优良食味水稻的培育方法，其特征在于：

1)选用Wx位点上基因型为Wx-bWx-b的江苏高产粳稻品种武香粳14为母本(♀)与暗胚乳突变基因型为Wx-mqWx-mq的优质粳稻品种关东194为父本杂交配组(其中Wx-mq相对于Wx-b为隐性遗传)；

2)种植F₁、F₂、F₃，成熟后全部单株混收；

3)F₄开始选择株高100～110cm、每株8～10穗、每穗130～150粒的单株；

4)F₅开始进行分子标记辅助选择，各世代在农艺性状稳定的小区移栽后30天采取单株叶片2～3片，用SDS法提取DNA，用CAPS标记序列进行PCR扩增：

正向序列为TGTGGCTGAGGTAGGAGCA，

反向序列为AACGCATCTGGTTGTCTTTGT；

PCR反应体系：模板DNA 10ng/μl 1μl；引物对4pmol/μl 0.8μl；10×缓冲液1μ1；MgCl2(25mM)0.6μl；dNTP(2.5mM)0.2μl；Taq酶5U/μl 0.1μl；ddH₂O 6.3μl；反应总量10μl。PCR反应在MJ Reseach PTC-200热循环仪上进行，反应程序包括：94℃预变性5min，每个循环94℃变性30sec，52.2℃退火30sec，72℃延伸1min，共35个循环，最后72℃延伸7min，12℃保存；