[发明专利]水环境微生物修复剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于应用生物技术领域，涉及一种水环境微生物修复剂及其制备方法。

背景技术

随着水产集约化养殖的出现，养殖密度大幅度的提高，导致水体中残饵和动物排泄物增多，在这样的环境条件下，促使微生物大量繁殖(包括致病菌)、COD、氨氮含量上升、溶氧下降，养殖环境不断恶化，使得水产养殖业遭受巨大损失。水质因子对养殖成败和产量的影响越来越引人注意。水质良好，病原菌少，养殖的水生动物生长自然就好；而水质条件差，有毒物质积累，病原菌多且致病力强，养殖的水生动物便容易受到侵害；同时，由于同类生物之间存在着竞生作用，当向养殖水体中有选择地投入一定量的有利水质改良、能分解水中有机物和有害物质而对养殖生物无害的微生物制剂或菌种后，一种新的平衡关系得以建立，水质得到了改善，病原菌的生长受到抑制，养殖生物就可以健康地生长发育。

近几年微生物制剂在水产上已有所应用，但存在着很多问题，如一些是水环境以外的微生物，这些微生物到了水体中不能适应水体环境，不能迅速成为水体的优势菌群；另外，一些微生物不能产生酶，只是单纯的吸收水体的小分子营养物质，不能有效地降解残饵和粪便，效果比较慢。

发明内容：

本发明的目的是针对上述微生态制剂在水产环境改良上存在的问题，提供一种含生物酶的水环境微生物修复剂。

本发明另一个目的是提供上述水环境微生物修复剂的制备方法。

本发明的目的是通过下列技术措施实现的：

一种水环境微生物修复剂，该修复剂各组分微生物在微生物总质量中的质量百分比为：枯草芽孢杆菌30％～40％，地衣芽孢杆菌30％～40％，放线菌10～20％，反硝化细菌10～20％，光合细菌10～20％。具体产品中所述各微生物组分之和为100％。

所述的水环境微生物修复剂，每克或每ml该微生物修复剂中菌含量不低于5.0×10⁸CFU，蛋白酶活性不低于200U，淀粉酶含量不低于100U。

所述的水环境微生物修复剂的制备方法，该方法是将各组分微生物分别培养再按一定比例混合制成微生物修复剂。

所述的水环境微生物修复剂的制备方法，包括下述步骤：

a.一级种子液的制备：分别将活化的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、反硝化产碱杆菌菌种接种到无菌的pH7.0～7.5的营养肉汤中，放线菌接种在灭菌的淀粉液体培养基中，30～37℃，150～200rpm，过夜培养；光合细菌在光合细菌液体培养基中，30～37℃，光照培养4-7天，光照强度1000-2000Lx，获得各菌种的一级种子液；

b.二级种子液发酵：分别将步骤a所培养的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、反硝化产碱杆菌、放线菌一级种子液按发酵罐体积10～15％的接种量接入发酵罐，培养基同步骤a所用，30～37℃，150～200rpm，通入经0.45μm滤膜过滤的过滤空气，通气量为发酵罐体积0.5-1倍/min，压力0.1～1MPa，发酵12～18小时；

c.生产液发酵：分别将二级种子液打入发酵罐中，培养基同步骤a所用，接种量为发酵罐体积的8-12％，30～37℃，150～200rpm，通入经0.45μm滤膜过滤的过滤空气，通气量为发酵罐体积0.8-1倍/min，压力在0.5～1.0MPa，发酵24～36小时；光合细菌直接将一级种子液接种到透明的装有光合细菌液体培养基的发酵罐中，接种量为发酵罐体积的8-12％，30～37℃，光照培养4-7天，光照强度1000-2000Lx；

d.单独发酵完成后将发酵液装入贮液罐，按照各组分微生物在微生物总质量中的质量百分比取枯草芽孢杆菌30％～40％，地衣芽孢杆菌30％～40％，放线菌10～20％，反硝化细菌10～20％，光合细菌10～20％混合制成液体微生物修复剂；或者

将单独发酵的发酵液通过离心或者加载体吸附，形成固体，按照各组分微生物在微生物总质量中的质量百分比取枯草芽孢杆菌30％～40％，地衣芽孢杆菌30％～40％，放线菌10～20％，反硝化细菌10～20％，光合细菌10～20％混合制成固体微生物修复剂。

所述的水环境微生物修复剂的制备方法，步骤d中液体微生物修复剂的菌含量不低于5.0×10⁸CFU/ml，蛋白酶活性不低于200U/ml，淀粉酶含量不低于100U/ml；固体微生物修复剂的菌含量不低于5.0×10⁸CFU/g，蛋白酶活性不低于200U/g，淀粉酶含量不低于100U/g。

本发明有益效果：