[发明专利]白花蛇舌草悬浮细胞培养制备半乳糖醇

说明书

技术领域

本发明是关于半乳糖醇的制造方法，更具体地说，是关于从白花蛇舌草悬浮细胞系培养液中制备半乳糖醇的方法。

背景技术

半乳糖醇属于生化试剂，主要用于细菌鉴别，培养基配方方面，是微生物研究防病治病必不可少的重要糖类，半乳糖醇注射液是治疗类风湿必不可少的重要药物，将半乳糖醇与溴化氢作用，可以制造1，6-二溴-1，6-二脱氧半乳糖醇，它是一种极好的细胞抑制剂，治疗脊髓白血病时，优于传统的1，6-二溴-1，6-二脱氧甘露糖醇，而且有效剂量明显少，它还可以用于药品赋形剂，明显提高药品的外观片与稳定性。

目前，半乳糖醇主要由两种方法制备，一种是由半乳糖加氢制得，由于自然界中半乳糖量比较少，而且总是与其它糖混合在一起，半乳糖与其他糖类的分离与提取难度较大，半乳糖醇的生产与制备难度比较大；另一种是从部分中药中提取；最近禹城福田药业从木糖醇母液中模拟流动床分离得到半乳糖醇无色单斜柱状晶体。无论哪种方法，半乳糖醇的纯化均比较困难，收率低，造成市场价格较高，尚不能工业化生产。

发明内容

本发明是从白花蛇舌草悬浮细胞系培养液中制备得到半乳糖醇，具有分离简单，纯度高的优点，可以显著克服现有半乳糖醇制备方法的缺点。白花蛇舌草悬浮细胞系已公开发表在《海峡药学》2006年第18卷6期132-134页论文《白花蛇舌草细胞悬浮培养的建立与条件优化》中。

本发明通过下述技术方案予以实现：将白花蛇舌草悬浮细胞系培养液4000rpm离心20分钟，取沉淀，用原培养液体积1/3的水10～20分钟超声溶解，浓缩至2～3ml浓缩液/300ml，用3～5倍浓缩液体积的丙酮沉淀离心，沉淀加1～3倍浓缩液体积的氯仿溶解，-4℃冷藏放置过夜，得到的白色细小碎结晶即为半乳糖醇。

所述水提液最好经超声10～20分钟，丙酮沉淀体积最好为3～5倍浓缩液体积，氯仿体积1倍浓缩液体积即可，结晶温度为-4℃。

附图说明

下面结合附图和实施例对本发明专利进一步说明。

图1是从白花蛇舌草悬浮细胞系培养液中制备半乳糖醇流程图。

图2是半乳糖醇结构图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步的描述：

将白花蛇舌草悬浮细胞培养液4000rpm离心20分钟，取沉淀，用1/3倍培养液体积的水10～20分钟超声溶解，浓缩至2～3ml浓缩液/300ml培养液，用3～5倍浓缩液体积的丙酮沉淀，离心后取沉淀加1～3倍浓缩液体积的氯仿溶解，-4℃冷藏放置过夜，得到的白色细小碎结晶即为半乳糖醇。

上述工艺条件不需再进行进一步纯化，所得半乳糖醇为色谱纯，如想进一步精制，可用氯仿洗。

下面是制备半乳糖醇的实施例。通过实施例可以了解不同制备工艺条件对半乳糖醇纯度及含量的影响。

实施例1：

取白花蛇舌草悬浮细胞培养液4000rpm离心20分钟，取沉淀，用1/3倍培养液体积的水10分钟超声溶解，浓缩至2～3ml浓缩液/300ml培养液，用3倍浓缩液体积的丙酮沉淀，离心后取沉淀加1倍浓缩液体积的氯仿溶解，-4℃冷藏放置过夜，半乳糖醇得率为0.2g/L培养液左右。

实施例2：

取白花蛇舌草悬浮细胞培养液4000rpm离心20分钟，取沉淀，用1/3倍培养液体积的水20分钟超声溶解，浓缩至2～3ml浓缩液/300ml培养液，用4倍浓缩液体积的丙酮沉淀，离心后取沉淀加2倍浓缩液体积的氯仿溶解，-4℃冷藏放置过夜，半乳糖醇得率为0.3g/L培养液左右。

实施例3：

取白花蛇舌草悬浮细胞培养液4000rpm离心20分钟，取沉淀，用1/3倍培养液体积的水20分钟超声溶解，浓缩至2～3m1浓缩液/300ml培养液，用5倍浓缩液体积的丙酮沉淀，离心后取沉淀加3倍浓缩液体积的氯仿溶解，-4℃冷藏放置过夜，半乳糖醇得率为0.5g/L培养液左右。