[发明专利]植物组织切片中多酚化合物的快速检查方法

说明书

技术领域

本发明属于植物组织化学定性分析，具体涉及一种植物组织切片中多酚化合物的快速检查方法。

背景技术

目前，在植物组织徒手切片、滑走切片、冰冻切片等切片中，一般用于简单检验多酚类化合物的Hoepfner-Vorsatz反应，是由溶液中的亚硝酸钠氧化多酚化合物，多酚化合物氧化后通过溶液中的尿素聚合，聚合物在碱性条件下显红色。所述Hoepfner-Vorsatz反应不能区别多酚化合物和多酚氧化物的聚合物，在多酚氧化物聚合物的干扰下其定性分析误差较大，并且Hoepfner-Vorsatz反应的溶液配制过程较为繁琐。

紫外光激发多酚化合物与铝离子的配位化合物发出荧光的相关理论及技术已经运用于环境科学，化学分析等领域，但在植物组织切片的组织化学定性定位中没有发明出相关的研究技术。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种简便快速的植物组织切片中多酚化合物检查方法。

本发明的目的通过以下技术方案来予以实现：

提供一种植物组织切片中多酚化合物的快速检查方法，采用铝离子与植物组织切片中多酚化合物形成配位化合物，通过观察紫外光激发多酚化合物与铝离子的配位化合物发出荧光进行定性定位测定多酚化合物。

所述植物组织切片中多酚化合物的快速检查方法包括以下步骤：

(1)用蒸馏水配制0.1mol/L AlCl₃溶液；

(2)制备植物组织切片；

(3)将植物切片放置在载玻片上，滴加0.1mol/L AlCl₃溶液，盖上盖玻片；静置时间不宜超过30min；

(4)把装有切片的玻片放置在带有紫外光装置的显微镜下观察植物组织结构中出现的银灰色荧光。

步骤(2)所述植物组织切片为徒手切片、滑走切片或冰冻切片的任意一种新鲜切片。本发明优选冰冻切片。

步骤(3)AlCl₃溶液滴加1～2滴。

步骤(4)所述紫外光波长范围为340～380nm。

作为本发明的优选方案，所述植物组织切片为小于20微米的冰冻切片，显微镜放大倍数为40x或100x。

本发明还可以包括运用显微拍照系统对结果进行拍照记录的步骤，以便获得更直观的分析结果。

本发明的思路是：铝离子可以与多酚化合物形成配位化合物，在紫外光照射下产生荧光；植物体内的多酚化合物氧化后，氧化物自身聚合或与细胞内的蛋白质反应产生的黑色或褐色沉积物不会吸收紫外光产生荧光。所以，本发明建立了紫外光激发多酚化合物与铝离子的配位化合物发出荧光的理论基础。

本发明的有益效果是：本发明克服了现有检测方法中多酚氧化物聚合物的干扰，不能准确定性植物切片中多酚化合物的缺点，不仅能为植物组织切片中的多酚化合物准确定性定位，排除一般多酚组织化学定性分析中多酚氧化物聚合物对分析结果的干扰，而且在同一条件处理下可根据荧光的强弱判断多酚化合物含量的多少，并观察多酚化合物在植物细胞组织中的变化情况。本发明方法操作简单，快速准确。

附图说明

图1滴加AlCl₃溶液处理后的紫锥菊根茎的20微米冰冻切片紫外光照射下发出的荧光照片

图2酒精提取多酚后，滴加AlCl₃溶液处理的紫锥菊根茎的20微米冰冻切片紫外光照射下发出的荧光照片

图3不采用AlCl₃处理的情况下紫锥菊根茎的20微米冰冻切片紫外光照射下发出的荧光照片

图4常温下处理的紫锥菊根茎切片采用本发明方法观察到的紫外光照射下发出的荧光照片

图5 60℃水浴处理的紫锥菊根茎切片采用本发明方法观察到的紫外光照射下发出的荧光照片

图6 80℃水浴处理的紫锥菊根茎切片采用本发明方法观察到的紫外光照射下发出的荧光照片

图7 100℃水浴处理的紫锥菊根茎切片采用本发明方法观察到的紫外光照射下发出的荧光照片

具体实施方式

下面结合具体实施例来进一步说明本发明。

实施例1

(1)用蒸馏水配制0.1mol/L AlCl₃溶液；

(2)制备新鲜的植物组织切片，可采用常规的徒手切片、滑走切片和冰冻切片等各种新鲜切片；