[发明专利]一种治疗肝癌及多药抗性肿瘤的复方化疗药物

说明书

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，特别是涉及治疗肝癌及多药抗性肿瘤的青蒿素类、谷胱甘肽耗竭剂和抗氧化物酶抑制剂复方化疗药物。

背景技术

恶性肿瘤是仅次于心脑血管病的第2大致死性疾病。据世界卫生组织1996年报告，全球肿瘤新发病例高达900万，其中我国发病160万。另据美国癌症协会统计，2002年全球因患癌症死亡的人数为670万，到2020年，这一数字将达到1030万。我国男性中肝癌的发病率高居世界榜首，每10万人中有36.7人。肝癌的最佳治疗方法是外科手术切除，但由于肝癌患者早期症状不明显，加上肝癌细胞血液供应充沛，使得多数肝癌的增殖、进展比其他脏器的肿瘤更快，而且易形成门静脉癌栓，造成肝癌血行播散和转移复发，一般仅有20％的患者获得手术机会，而大部分肝癌患者在确诊后半年内死亡。由于现有化疗药物普遍缺乏专一性和靶向性，对肝癌患者进行全身性系统化疗不仅毒副作用严重，而且疗效令人失望，更糟糕的是全身化疗并不能真正提高肝癌患者的生存率。同时，随着化疗药的广泛使用以及随之而来的多药抗性现象的出现，肿瘤对化疗药的敏感性越来越低，某些化疗药的抗肿瘤作用日益下降，导致患者的救治率及生存率进一步降低。有鉴如此，目前亟待开发新的靶向性和低毒副作用并能克服多药抗性的肿瘤化疗药。

自1993年Woerdenbag等首次报道青蒿素对Ehrlich肿瘤细胞具有细胞毒性以来，青蒿素在抗白血病(IC₅₀＝1.11μmol/L)、结肠癌(IC₅₀＝2.13μmol/L)等非实体及实体肿瘤中的有效性已得到验证。我们的研究也发现，青蒿素琥珀酸酯可特异性诱导肝癌细胞凋亡，已通过电镜成像和流式细胞分析获得证实。青蒿素作为肿瘤化疗药的特点在于：(1)对肿瘤细胞的靶向性攻击：肿瘤细胞的快速增殖使其高效表达转铁蛋白及其受体而能富集高浓度的铁，而青蒿素正是以其独特的过氧桥结构与铁反应产生碳自由基而发挥肿瘤杀伤作用。肝脏是全身含铁最为丰富的器官，它不仅有丰富的血红蛋白(含血红素即铁卟啉)，而且有大量含铁的胆红素和细胞色素，因而更有利于青蒿素类对白血病及肝肿瘤细胞的定向杀伤；(2)毒副作用低：青蒿素抗肿瘤的作用机理主要是诱导肿瘤细胞凋亡，不会干扰正常细胞的生物合成及代谢过程，因而毒性很低。另外，长期的疟疾临床观察也证明，青蒿素没有明显的毒副作用；(3)无交叉耐药性：青蒿素作用迅速，不易诱导抗药性，而且青蒿素作用靶点与其他抗肿瘤药物完全不同，因而抗其他化疗药的肿瘤并抗青蒿素。体外研究还发现，青蒿素能阻断卡波济氏肉瘤的血管形成而抑制其生长，表明青蒿素还能通过阻断肿瘤细胞的血液供应导致其因饥饿而迅速死亡。

可是，10余年来，青蒿素并未作为主流的抗肿瘤药在临床上应用，主要原因在于青蒿素易被体内高浓度的非蛋白质巯基化合物尤其是还原型谷胱甘肽(GSH)所破坏。由于长期未能解决这个难题，导致青蒿素难以发挥速效、靶向、低毒的抗肿瘤作用。大量研究表明，放射增敏剂丁胱亚磺酰亚胺(BSO)可抑制γ-谷胱甘肽合成酶活性，阻断GSH的生物合成，提高肿瘤对放疗的敏感性。我们研究发现，马来酸二乙酯(分子量172.18)和N-乙基马来酰亚胺(分子量125.12)等小分子化合物也能使肿瘤细胞内的GSH耗竭。利用这类谷胱甘肽耗竭剂将可以消除GSH对青蒿素的破坏作用，从而提高青蒿素的抗肿瘤活性，尤其是促进青蒿素对活体内肿瘤的杀伤力。另一方面，多药抗性肿瘤之所以能产生多药抗性，除药泵的作用外，最重要的原因是其解毒系统成分GSH的含量高于其他肿瘤细胞，更高于正常组织细胞。由此可见，谷胱甘肽耗竭剂不仅能显著降低肿瘤的多药抗性，而且对青蒿素的抗肿瘤活性具有增敏作用。

青蒿素用作肿瘤化疗药的另一个不足之处是易诱导肿瘤细胞中抗氧化酶(主要是谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶)基因的表达，从而抵消青蒿素碳自由基对肿瘤的杀伤作用。因此，特异性抗氧化酶抑制剂的应用将可消除抗氧化酶对青蒿素的淬灭作用。我们通过实验已确认，作为谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶抑制剂的巯基琥珀酸(又名硫代苹果酸)和3-氨基三唑可通过降低肿瘤的抗氧化酶活性显著提高青蒿素对肿瘤的杀伤力。