[发明专利]MiRNA在中枢神经系统白血病诊断中的应用及其试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及生物医学诊断领域，具体涉及miRNA表达谱在中枢神经系统白血病诊断中的应用及其试剂盒。

背景技术

MicroRNA(简称miRNA)，是一种非编码的单链RNA小分子。通过互补结合靶基因mRNA的3’UTR(非翻译区)发挥翻译后消减或抑制的作用。1993年，Lee等(Lee，R.C.，Feinbaum，R.L.，Ambros，V，The C.elegans heterochronic gene lin-4 encodes small RNAs with antisense complementarity to lin-14.Cell.1993.75，843-854.)采用经典克隆方法在线虫中首次克隆到lin-4基因，通过点突变的方法证实了小分子RNA的存在。2000年，Reinhart等(Reinhart，B.J.，Slack，F.J.，Basson，M.，Pasquinelli，A.E.，Bettinger，J.C.，Rougvie，A.E.，Horvitz，H.R. & Ruvkun，G.(2000)The 21-nucleotide let-7RNA regulates developmental timing in Caenorhabditis elegans.Nature，403，901-906.)在人和果蝇中发现了let-7的存在，于是推测这类小分子RNA可能是一类生物进化上保守的基因，广泛存在于真核生物的基因中，在生命活动中起到重要作用的调控分子。目前，人们在线虫、植物、果蝇、病毒、节肢动物和哺乳动物中发现了成千上万种miRNA。其中，600多种人的miRNA序列已被克隆。根据计算机的预测，大约人类基因的10～30％是miRNA调控的靶基因，一个靶基因可能含有多个miRNA的互补结合位点；miRNA相对较小，一个miRNA能够互补结合几百个靶基因，形成一个调控网络(John，B.，Enright，A.J.，etal.(2004)Human MicroRNA targets.PLoS Biology，2，e363.Lewis，B.P.，Burge，C.B. & Bartel，D.P.(2005)Conserved seed pairing，often flanked by adenosines，indicates that thousands of human genesare microRNA targets.Cell，120，15-20.)。研究表明，很多重要的生命活动如细胞的增殖，分化，器官的发育，神经系统的分化，造血系统的完整等方面都受到miRNA的调控。miRNA的异常表达与多种疾病发病相关，如肿瘤，感染性疾病，遗传性异常，甚至心脏病(Kim，V.N.(2005)MicroRNA biogenesis：coordinated cropping and dicing.Nature Reviews.Molecular Cell Biology，6，376-385.)。由此，miRNA的发现为我们研究基因组非编码区参与生命重要环节的调控带来了新的启示。

miRNA在不同的时空发育阶段表达量存在显著差异。通过miRNA芯片技术获得miRNA的表达谱，检测不同时空阶段miRNA的表达差异，可以推测参与特定发育阶段的相关miRNA。在此基础上，寻找miRNA靶基因，揭示其作用机制。全部miRNA作用机制的揭示将为我们对生命现象的深入理解提供重要线索。