[发明专利]一种基于微间隙阵列电极的酶催化电导免疫传感器及其检测传染性病毒的方法

权利要求书

1.一种基于微间隙阵列电极的酶催化电导免疫传感器，其特征是，采用微间隙阵列金电极做基片，并采用以下步骤制得：

(1)取常规光刻印刷法制作的微间隙阵列金电极做基片，它为叉指式双电极，正负电极均为两个梳形金电极，彼此交叉组成微间隙阵列金电极。梳形齿宽为1μm-100μm，间隙为1μm-100μm；

(2)微间隙阵列金电极的硅烷化处理，过程是：

a.将微间隙阵列金电极用无水乙醇清洗三次，每次1min；

b.将所述电极浸入1M的NaOH溶液中28min-32min，再用超纯水清洗该电极三次，每次1min；吹干；

c.将所述电极浸入含氨丙基三甲氧基硅烷5％(体积百分数)的乙醇溶液中，室温下静置23小时-25小时；这样可在微间隙阵列金电极间的基片上形成一氨基硅烷自组装单层；

d.用超纯水清洗所述电极三次，吹干，即获得硅烷化的微间隙阵列金电极；

(3)免疫传感器的制备，步骤是：

a.将所述硅烷化的微间隙阵列金电极浸入质量分数为5％的戊二醛水溶液，室温下静置0.8小时-1.2小时；

b.用超纯水清洗所述电极三次后，在该电极上滴加30μL传染性病毒的重组抗原(双抗原夹心法)或传染性病毒的特异抗体(双抗体夹心法)，室温下静置反应1小时；该传染性病毒的重组抗原或特异抗体溶液是将所述抗原或抗体溶于0.01M、pH7.4磷酸缓冲溶液而得，溶液中所述浓度为100μg/mL；

c.用超纯水清洗所述电极三次，吹干，即得免疫传感器。

2、一种采用所述基于微间隙阵列电极的酶催化电导免疫传感器检测传染性病毒的方法，其特征是，该方法的步骤为：

(1)将20μL感染传染性病毒的血清或正常血清样品溶液与20μL碱性磷酸酶标记的重组抗原(双抗原夹心法)或碱性磷酸酶标记的特异抗体(双抗体夹心法)溶液混合，滴加在电极上，于室温下静置反应0.5小时；重组抗原或特异抗体浓度为10μg/mL，它是将所述重组抗原或特异抗体溶于0.01M、pH7.4磷酸缓冲溶液而得；碱性磷酸酶标记的重组抗原或特异抗体通过感染血清中的抗体或病毒产生的抗原与固定化的重组抗原或特异抗体发生夹心反应而被捕获到传感器表面上；

(2)将所述传感器置于银沉积溶液中，该银沉积溶液系将1mM抗坏血酸磷酸酯、2mM AgNO₃溶于0.1M甘氨酸-NaOH缓冲溶液而得，溶液pH9.0；室温下静置反应8min-12min；再从该电极获取与传染性病毒抗原或抗体浓度相关的电导或电阻信号。