[发明专利]定量测定糖化蛋白质的方法

权利要求书

1.一种定量测定糖化蛋白质的方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

①A-B组合：吸取5-50微升溶血稀释液到抗体A包被的固相中，然后加100微升标本稀释液、100微升探测标签标记的抗体B，充分摇匀后静置室温5-30分钟；

②A-C组合：吸取5-50微升溶血稀释液到另一抗体A包被的固相中，然后加100微升标本稀释液、100微升探测标签标记的抗体C，充分摇匀后静置室温5-30分钟；

③A-B标准品组合：分别吸取5-50微升糖化蛋白质和非糖化蛋白质的标准品到不同的抗体A包被的固相中，然后分别加100微升标本稀释液、100微升探测标签标记的抗体B，充分摇匀后静置室温5-30分钟；

④A-C标准品组合：分别吸取5-50微升糖化蛋白质和非糖化蛋白质的标准品到不同的抗体A包被的固相中，然后分别加100微升标本稀释液、100微升探测标签标记的抗体C，充分摇匀后静置室温5-30分钟；

⑤倾去所有固相中的反应液，然后用洗涤液300微升洗五次；拍干残陈液滴；

⑥在每个固相微孔中加100微升标记酶底物，静置室温5-30分钟；

⑦在每个固相微孔中加100微升中止液，充分摇匀后在读数仪上读数；

⑧在A-B组合中得到的标本数据，与A-B标准品组合比较，计算出糖化蛋白质浓度；

⑨在A-C组合中得到的标本数据，与A-C标准品组合比较，计算出总蛋白质浓度；

⑩把糖化蛋白质浓度除以总蛋白质浓度即得到糖化蛋白质百分比浓度；

其中所述的糖化蛋白质为糖化白蛋白或糖化血红蛋白；

其中抗体A对总蛋白质特异；抗体B对糖化蛋白质特异；抗体C对总蛋白质特异。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的抗体A包被的固相为普通微孔板、发光微孔板、荧光微孔板、普通微颗粒或磁颗粒。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的标记抗体B、C的探测标签为标记酶、同位素、荧光化合物或化学发光复合物。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤⑥中所述的标记酶底物是3，3’5，5-四甲基联苯胺和过氧化氢溶液、化学发光底物溶液或荧光底物溶液。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤⑦中所述的读数仪是酶标读数仪、化学发光读数仪、荧光读数仪或同位素计数仪。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述的标记酶为过氧化氢酶、碱性磷酸酶或半乳糖苷酶。

7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述的标记酶底物为3，3’5，5-四甲基联苯胺和过氧化氢溶液。

8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述的标记酶底物为化学发光底物溶液或荧光底物溶液时，不需要加中止液。