[发明专利]一种血清中氯霉素残留量的液相色谱-串联质谱测定方法

权利要求书

1.一种血清中氯霉素残留量的液相色谱-串联质谱测定方法，包括：

a、空白血清样品中添加氘代氯霉素为内标物和采用液-液萃取进行预处理。

b、取预处理后的血清样品进行HPLC-MS/MS测定；采用硅胶键合相填料C₁₈、C₈、氰基的细径色谱柱内径为1.0-3.0mm；长度为30-100mm和由乙腈或甲醇和含氨水和醋酸铵PH＝6-9或甲酸或乙酸0.01～0.5％V/V水溶液组成的流动相，进行等度或梯度洗脱；

c、质谱检测采用电喷雾离子源，负离子多反应监测扫描。离子选择通道为Q1/Q3m/z分别为氯霉素：321/151或/和321/176或/和321/257；内标物为氘代氯霉素：326/156或/和326/179或/和326/262。

2.根据权利要求1所述的血清中氯霉素含量测定方法，其特征在于液-液萃取提取氯霉素的溶剂包括甲醇、乙酸乙酯、乙酸甲酯、丙酮、乙腈、特丁基甲醚或乙醚。

3.根据权利要求1所述的血清中氯霉素含量测定方法，其特征在于色谱柱长度为30-100mm，内径为1.0-3.0mm，填料为C₁₈、C₈或氰基硅胶键合相。

4.根据权利要求1所述的血清中氯霉素含量测定方法，其特征在于采用HPLC-MS以氘代氯霉素为内标，采用C₁₈、C₈或氰基填料的色谱柱，流动相为含有乙腈或甲醇和含氨水和醋酸铵(PH＝6-9)及甲酸或乙酸(0.01-0.05％)水溶液组成，进行等度或梯度洗脱。

5.根据权利要求1所述的血清中氯霉素含量测定方法，其特征在于在血清中添加以氘代氯霉素为内标，以内标法进行定量。

6.根据权利要求1所述的血清中氯霉素含量测定方法，其特征在于采用流动相进行等度或梯度洗脱，乙腈∶1-100mmol醋酸铵水溶液(用氨水调节PH＝6-9)为80-20％∶20-80％V/V。

7.根据权利要求1所述的血清中氯霉素含量测定方法，其特征在于采用流动相进行等度或梯度洗脱乙腈；含甲酸的水为80-20％∶20-80％V/V。

8.根据权利要求1所述的血清中氯霉素含量测定方法，其特征在于其定量工作曲线系在空白血清中添加0.1-25.6ppb的氯霉素标样后，按权利要求2和3方法进行提取后获得。