[发明专利]黄瓜侧枝抑制基因cls的蛋白编码序列无效

专利信息
申请号: 200810034529.X 申请日: 2008-03-13
公开(公告)号: CN101240281A 公开(公告)日: 2008-08-13
发明(设计)人: 原丽华;蔡润;朱立煌;姚丹青;张弛 申请(专利权)人: 上海交通大学
主分类号: C12N15/29 分类号: C12N15/29;C12N15/79;C12N1/19;C12N5/10;C07K14/415;C12Q1/68;A01H1/00;A01H5/00
代理公司: 上海交达专利事务所 代理人: 王锡麟;王桂忠
地址: 200240*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 黄瓜 侧枝 抑制 基因 cls 蛋白 编码 序列
【说明书】:

技术领域

发明涉及的是一种基因工程技术领域的编码序列,特别是一种黄瓜侧枝抑制基因cls的蛋白编码序列。

背景技术

植物分枝发育在植物形态建成中有重要的地位。作物分枝是影响作物产量的重要农艺性状之一,在玉米的驯化过程中通过减少分枝可以达到增产的目的,在水稻中分蘖数目过多或者过少都不利于产量的提高。对于黄瓜来说,产量高低和侧枝数目也有密切的关系。到目前为止,黄瓜侧枝一直被作为数量性状进行研究,已经定位了几个和侧枝发育相关的QTLs。但从来没有分离得到基因,更没有进行过详细研究。但在玉米、水稻、拟南芥、番茄、豌豆中已经分离得到了多个和侧枝发育相关的基因,其中最引人注目的是番茄侧枝抑制基因ls的分离和功能验证。番茄的ls基因是最早影响腋生分生组织形成的基因之一,是植物特有的GRAS转录因子家族的重要成员。GRAS基因家族的蛋白产物均为转录因子,具有调控其它基因转录的能力,名字由最早发现的三个成员,GAI,RGA,SCR的首字母拼写而成。典型的GRAS蛋白有400-700个氨基酸组成,两个亮氨酸七聚体重复序列(Leucine Heptad Repeats)包围的VHIID结构域,一个保守的C-末段和长度、序列可变的N-末端,也就是N-末端的序列赋予了其物种特异性。本发明克隆的基因cls也属于GRAS基因家族,预测应该也是一个转录因子。

在对现有技术文献的分析中,虽然《Proc.Natl.Acad.Sci.USA美国国家科学院学报》,1999,1,96:290-295发表了文章“The lateral suppressor(Ls)geneof tomato encodes a new member of the VHIID protein family番茄侧枝抑制基因Ls编码蛋白是VHIID家族的一个新成员”对番茄侧枝抑制基因Ls的功能作了详细阐述;《Theor Appl Genet理论运用遗传学》在2003,107:875-883发表的文章“Comparative analysis of response to phenotypic andmarker-assisted selection for multiple lateral branching incucumber(Cucumis sativus L.)黄瓜多侧枝性状的分子标记辅助选择与表型的比较分析”对多侧枝性状进行了QTLs定位,但并未分离得到基因。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中的不足,提供一种黄瓜侧枝抑制基因CLS的编码序列。本发明可以促进侧芽原基形成,用于粮食作物、花卉植物、经济作物、油料作物上,增加它们的侧枝数目,从而增加产量。

本发明是通过以下技术方案实现的:

在本发明的一个方面,提供了一种分离出的cDNA分子,该分子包括:编码具有黄瓜侧枝抑制蛋白活性的多肽的核苷酸序列,所述的核苷酸序列与SEQ IDNO.3中从核苷酸第491-1666位的核苷酸序列有至少70%的同源性。或者所述的核苷酸序列能在中度严紧条件(杂交温度在55℃-60℃之间)与SEQ ID NO.3中第491-1666位的核苷酸序列杂交。较佳地,所述的核苷酸序列具有SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列的多肽,或其保守性变异多肽、或其活性片断,或其活性衍生物。更佳地,所述的编码序列具有SEQ ID NO.3中第491-1666位的核苷酸序列。

在本发明另一个方面,提供了一种分离出的黄瓜侧枝抑制基因的蛋白质多肽,它包括:具有SEQ ID NO.3氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段。该多肽在植物腋生分生组织形成的早期表达,是植物侧生器官形成必不可少的蛋白。

本发明还提供了一种载体,它包含上述的DNA分子。一种核酸分子,它包含所述的DNA分子中8-100个连续核苷酸。

本发明还提供了一种用上述载体转化的宿主细胞,它是真核细胞。在实例中该宿主细胞是拟南芥。

本发明中,“分离的”、“纯化的”DNA是指,该DNA或片段已从天然状态下位于其两侧的序列中分离出来,还指该DNA或片段已经与天然状态下伴随核酸的组分分开,而且已经与在细胞中伴随其的蛋白质分开。

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