[发明专利]一种人工扩繁暖地大叶藓配子体的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种人工扩繁暖地大叶藓配子体的方法，属于生物工程技术领域。

背景技术

暖地大叶藓(Rhodobryum giganteum)隶属真藓科大叶藓属植物，与同属植物大叶藓(Rhodobryum roseum)统称为回心草。回心草是地方习用药，也是彝、傣、哈尼族等使用的民族药。近年来我国有关大叶藓属植物(主要以暖地大叶藓为供试材料)药理作用的研究、现代临床研究及制剂应用研究都确定了其在治疗冠心病、心绞痛以及高血压和高血脂等疾病中的疗效。该种药用植物制剂目前有云南英茂生物制药有限公司生产的回心康片和陕西长武制药厂生产的回心草片剂和针剂。

目前作为药材使用的回心草-暖地大叶藓，均来源于野生资源，以全草入药，在夏、秋季采收，药材组成主要是干缩的配子体。利用野生暖地大叶藓进行大规模制药生产将会面临诸多问题：首先，自然生长过程中常受到自然环境变化的影响，会存在各种变异个体或群体，会影响资源产量和资源性状的一致性和稳定性；其次，采收期的不同、产地的不同等均会影响药材质量的稳定性；更重要的是野生植物资源在自然界中的分布是零散的，几乎没有大面积成片的现象，一旦野生植物成为重要开发资源，仅靠野生资源一方面很难满足市场需要，另一方面，在开发利用的压力下，极易遭到破坏，对物种生存构成直接威胁。因此，通过人工扩繁暖地大叶藓，为制药领域提供丰富的植物药材势在必行。但目前现有技术中还没有关于大叶藓属植物在试管内大量扩繁配子体的培养技术，更没有将大叶藓属植物组织培养成配子体的相关技术报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种人工扩繁暖地大叶藓配子体的方法，以填补现有技术的空白，实现人工大量扩繁暖地大叶藓、为制药领域提供丰富植物药材的目的。

为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明公开的人工扩繁暖地大叶藓配子体的方法包括以下顺序步骤：

1)将生长于自然环境中未展开叶片的暖地大叶藓配子体表面消毒后，切取茎尖接种到诱导配子体产生原丝体的培养基上，进行培养40～60天，培养条件为：温度20～25℃，光照强度2000～4000lx，光照时间10～12小时/天；所述诱导配子体产生原丝体的培养基配方为：改良Knop培养基+0～2.0mg/l2，4-二氯苯氧乙酸+0～0.10mg/l 6-苄基氨基嘌呤+5～10g/l蔗糖；其中改良Knop培养基配方为：KCl 76.04mg/l、MgSO₄·7H₂O 828.2mg/l、KH₂PO₄250.4mg/l、Ca(NO₃)₂·4H₂O 1001.3mg/l、CuSO₄·5H₂O 0.027mg/l、KI0.014mg/l、ZnSO₄·7H₂O 0.027mg/l、H₃BO₃ 0.309mg/l、Na₂MoO₄·2H₂O 0.012mg/l、MnCl₂·4H₂O 0.198mg/l、CoCl₂·6H₂O 0.027mg/l、FeSO₄·7H₂O 27.8mg/l、Na₂-EDTA 37.3mg/l、酒石酸氨0.1151mg/l；