[发明专利]植物种子胚的蛋白提取物的应用及其组合物有效
申请号: | 200810035935.8 | 申请日: | 2008-04-11 |
公开(公告)号: | CN101555270A | 公开(公告)日: | 2009-10-14 |
发明(设计)人: | 沙金 | 申请(专利权)人: | 浙江我武生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K1/00 | 分类号: | C07K1/00;C07K1/14;C12N9/96 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 | 代理人: | 范 征 |
地址: | 313200浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 植物种子 蛋白 提取物 应用 及其 组合 | ||
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种植物种子胚的蛋白提取物在稳定活性 蛋白质生物活性中的应用,该蛋白提取物的制备方法以及含有该蛋白提取物的组合 物。
背景技术
种子是植物界演化最高阶段的种子植物生活史中的一个时期,是下一代独立植 株的开始。成熟的种子是由胚(embryo)、胚乳(endosperm)和种皮(seed coat) 三部分组成。胚是种子最重要的部分,它是新植物的原始体,来自受精卵(合子)。 发育完全的胚是由胚芽(plumule)、胚根(radicle)、胚轴(hypocotyl)和子叶(cotyledon) 四部分组成。被子植物的种子包在由子房发育而成的果实里;裸子植物没有子房, 种子是裸露的。被子植物的种子在发育过程中,胚乳被吸收的称无胚乳种子,如黄 豆、棉花、油菜的种子;胚乳未被吸收的称有胚乳种子,如小麦、水稻、玉米的种 子。种子从结构和生理上已做好了传播的准备,也储藏了足够的养分以供幼苗生长 成为白养体。其中的蛋白质在种子形成、发育直至成苗的过程中扮演着极其重要的 角色,它为种子生长发育提供养料,还调控着种子的各种生理生化反应和代谢过程。
蛋白质是生命的最基本物质之一,是生命活动的物质基础,生命活动几乎都是 通过蛋白质实现的,有的蛋白质在生物体内是结构物质,有的蛋白质在生物体内是 功能物质(如作为生物催化剂的酶)。此外,许多蛋白质,如胰岛素、干扰素、免 疫球蛋白等等,都可以作为治疗疾病的药物。
由于蛋白质的分子量大,结构复杂,蛋白质分子很不稳定,易受物理或化学因 素的影响而变性,丧失其生物活性。蛋白质的不稳定性一是由于共价键引起的不稳 定性,如水解、氧化和消旋化,此外还有蛋白质的特有反应,即二硫键的断裂与交 换。另由非共价键引起的不稳定性,如聚集、宏观沉淀、表面吸附与蛋白质变性。 尤其当生物活性蛋白浓度较低时,易出现蛋白降解或蛋白被管壁吸附等现象,从而 影响蛋白质制剂的生物活性。解决蛋白质类药物的稳定性的方法之一是在低浓度的 蛋白药物中加入蛋白稳定剂,从而保护蛋白不被降解。这些蛋白稳定剂通常是动物 来源的蛋白,例如人血清白蛋白。然而,采用动物蛋白存在着严重的潜在风险,即 动物蛋白被未完全杀灭的动物病毒污染。例如,人血清白蛋白制品中因为艾滋病毒 的污染而发生公共危害的案例时有所闻。另外,动物蛋白一般仅仅是竞争性地防止 生物活性蛋白被管壁物理性地吸附,或被环境中的物理、化学和生物因子损伤,所 以其保护性也是有限的。
因此,本领域中迫切需要提供一种安全、廉价、高效的新型蛋白质稳定剂。
发明内容
本发明涉及一种植物种子胚的蛋白提取物在稳定活性蛋白质生物活性中的应 用。
在一个较佳的实施方案中,所述植物种子胚的蛋白提取物的制备方法包括用不 导致蛋白质严重降解或失活的蛋白质提取液(优选盐溶液,更优选 0.5%~2.5%(W/V)NaCl溶液,还要优选0.9%~2%(W/V)NaCl溶液,最优选0.9%(W/V) 生理盐水)对植物种子胚的蛋白进行提取的步骤。
在一个更佳的实施方案中,所述植物种子胚的蛋白提取物的制备方法包括以下 步骤:1)对植物种子的胚脱脂、干燥;2)使用不导致蛋白质严重降解或失活的蛋 白质提取液(优选盐溶液,更优选0.5%~2.5%(W/V)NaCl溶液,还要优选 0.9%~2%(W/V)NaCl溶液,最优选0.9%(W/V)生理盐水)提取,获得蛋白提取液;3) 对步骤2)得到的蛋白提取液除菌处理。
在一个还要佳的实施方案中,所述植物种子胚的蛋白提取物的制备方法包括以 下步骤:1)对植物种子的胚脱脂、干燥;2)用去离子水或者蒸馏水对步骤1)的 所述经脱脂、干燥的植物种子的胚进行提取,去除水溶性蛋白提取液,获得沉淀; 3)再使用盐溶液(优选0.5%~2.5%(W/V)NaCl溶液,更优选0.9%~2%(W/V)NaCl 溶液)对步骤2)获得的沉淀进行提取,收集盐溶性蛋白提取液;4)对步骤3)得 到的盐溶性蛋白提取液除菌处理。
在一个优选的实施方案中,所述植物种子选自玉米、小麦、水稻、高粱、大麦、 黑麦、燕麦、大豆、豌豆或黄豆的种子或其组合。
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