[发明专利]利用组织培养技术高效繁殖多年生野生大豆的方法

权利要求书

1、一种利用组织培养技术高效繁殖多年生野生大豆的方法，其特征在于，包括以下步骤：

第一步，种子灭菌及多年生野生大豆无菌苗的获得：取成熟的多年生野生大豆种子，用氯气或过饱和漂白粉精片溶液进行种子灭菌，用手术刀将种皮划破，将划破种皮的多年生野生大豆种子接种到萌发培养基上，经过培养得到无菌苗，为第二步提供植物材料；

所述萌发培养基为现有的MS培养基，B₅培养基，或MS培养基的无机成分加上B₅培养基的有机成分；

第二步，增殖及生根：待实生苗长至10cm，从无菌苗顶端向下3cm-4cm处切下茎端，将无菌苗茎段的植物学下端插入生根培养基中生根，作为第四步的材料，切去顶端的野生大豆实生苗作为第三步的材料；

所述生根培养基为MS固体培养基；

第三步，盆栽：将装有切去顶端的实生苗的瓶子打开，在培养室内生长3天，再移栽到装有灭菌的基质或土的盆中，待长出新枝后，将盆转移到户外，盆栽野生大豆在户外生长一周后移栽到田间；

第四步，第二步得到的已经生根的实生苗顶端幼茎，在生根培养基中经过半个月的培养，长出很多健康的根。

2、根据权利要求1所述的利用组织培养技术高效繁殖多年生野生大豆的方法，其特征是，第一步到第三步中，所述培养的温度为24℃-26℃。

3、根据权利要求1所述的利用组织培养技术高效繁殖多年生野生大豆的方法，其特征是，第四步中，如果需要继续繁殖，将已经伸长的茎端切下，重复第二步的步骤。

4、一种利用组织培养技术高效繁殖多年生野生大豆的方法，其特征是，包括以下步骤：

第一步，种子萌发：取成熟的多年生野生大豆种子，用手术刀将种皮划破。将划破种皮的多年生野生大豆种子接种到萌发培养基上，使种子萌发，为第二步提供植物材料；

所述萌发培养基为现有的MS培养基，B₅培养基，或MS培养基的无机成分加上B₅培养基的有机成分；

第二步，盆栽：待种子萌发3-4天，种子长出幼根，脱掉种皮，将幼苗植入经过灭菌的土壤或基质中，一个月后，换盆移栽到田间。

5、根据权利要求4所述的利用组织培养技术高效繁殖多年生野生大豆的方法，其特征是，第一步中，所述萌发培养基中进行培养，其培养温度为24℃-26℃。