[发明专利]一种星形孢菌素提取纯化的方法

权利要求书

1.一种星形孢菌素提取纯化的方法，其特征在于，包含以下步骤：

1)将星形孢菌素产生菌菌体的亲水性有机溶剂或亲水性有机溶剂的水溶液提取液除去有机溶剂后加入酸溶液至酸性，然后离心、取上清；

2)上清在碱性条件下用亲脂性有机溶剂萃取；

3)萃取液浓缩后，进行硅胶柱层析。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)所述的提取液为星形孢菌素产生菌菌体在碱性条件下用亲水性有机溶剂或亲水性有机溶剂的水溶液提取所得。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的星形孢菌素产生菌菌体由星形孢菌素产生菌的发酵液离心所得。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，提取时采用的亲水性有机溶剂或亲水性有机溶剂的水溶液的用量为星形孢菌素产生菌的发酵液体积的0.5倍以上。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的亲水性有机溶剂选自醇、酮和四氢呋喃；所述的醇选自甲醇和乙醇，所述的酮为丙酮。

6.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤1)所述的亲水性有机溶剂的水溶液为85％以上小于100％甲醇水溶液、85％以上小于100％乙醇水溶液或85％以上小于100％丙酮水溶液，上述百分比为重量百分比。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的亲水性有机溶剂的水溶液为90％的甲醇水溶液、90％的乙醇水溶液或95％的丙酮水溶液，上述百分比为重量百分比。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)所述的酸性为pH1～5。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)所述的酸溶液选自盐酸和草酸。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)所述的亲脂性有机溶剂选自乙酸乙酯、乙酸丁酯、氯仿、二氯甲烷、乙酸丙酯、丙酸乙酯和丙酸甲酯。

11.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的碱性条件为pH 8.0～14.0。

12.根据权利要求11所述的方法，其特征在于，所述的碱性条件为pH10.0～13.0。

13.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，所述的碱性条件为pH12.0。

14.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)所述的硅胶柱层析包括步骤：用体积比为100∶1～50∶1的氯仿-甲醇混合液为洗脱剂进行梯度洗脱，分步收集洗脱梯度为60∶1的目标物。

15.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括将硅胶柱层析得到的目标物进行浓缩或重结晶。