[发明专利]能辨别海带雌、雄配子体的特异分子标记有效
| 申请号： | 200810038221.2 | 申请日： | 2008-05-29 |
| 公开（公告）号： | CN101280340A | 公开（公告）日： | 2008-10-08 |
| 发明（设计）人： | 周志刚;刘艳省;毕燕会;李利华 | 申请（专利权）人： | 上海海洋大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/29;C12N15/11;C12N15/10 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 | 代理人： | 陆飞;盛志范 |
| 地址： | 200090*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 辨别 海带 配子体 特异 分子 标记 | ||
1、一种能辨别海带雌、雄配子体的特异分子标记，其特征在于海带雌配子体的特异性分子标记为Rf-763，其序列为SEQ.ID.NO3，海带雄配子体的特异性分子标记为Rm-239，其序列为SEQ.ID.NO4。
2、一种用于扩增海带雌、雄配子体基因组DNA的引物，其特征在于用于扩增海带雌配子体基因组DNA的引物对为Rf，序列为SEQ.ID.NO1，用于扩增海带雄配子体基因组DNA的引物对为Rm，序列为SEQ.ID.NO2。
3、一种如权利要求1所述的能辨别海带雌、雄配子体的特异分子标记的提取方法，其特征在于具体步骤如下：
(1)在17±1℃、30-40μmol m-2s-1光照条件下培养海带雌、雄性配子体无性繁殖系，收集并提取配子体的基因组DNA；
(2)根据GenBank上序列登录号为EU663626和EU663627的海带雌、雄配子体lhcf6基因的5’-侧翼序列设计两对引物SEQ.ID.NO1和SEQ.ID.NO2，分别对海带雌、雄配子体基因组DNA进行PCR扩增；
(3)回收特异扩增片段的DNA，利用pMD19-T载体、大肠杆菌感受态菌株JM109，进行克隆；挑选白色菌落，使用PCR法确认载体中插入片段的长度大小，将含有目的片段的菌液进行测序，获得两个特异分子标记，记为Rf-763和Rm-239，前者为海带雌配子体特异性分子标记，后者为海带雄配子体特异性分子标记，它们的序列分别是SEQ.ID.NO3和SEQ.ID.NO4。
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