[发明专利]从马比木中直接提取喜树碱的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种提取抗肿瘤药物化学成分喜树碱的生产方法，尤其是以湘西产马比木为原料，提取喜树碱的方法。

背景技术

喜树碱(Camptothecin，CPT)是1966年首先由美国科学家Wall等人从中国特有的珙桐科(Nyssaceae)植物喜树(Camptotheca acuminata)中提取得到的一种生物碱，具有独特的抗肿瘤疗效，但因其水溶性、脂溶性都很差，毒副作用较大，限制了其临床应用。1985年，John Hopkins大学的Hsiang等的研究结果表明，CPT是DNA拓扑异构酶I(Topo I)的特异性抑制剂，而Topo I是细胞的一种核酶，与DNA的复制、转录、修复以及重组有关，其在细胞周期的任何阶段都有表达，且已知肿瘤细胞中Topo I的含量比正常细胞中的含量高，因而这类抗肿瘤化合物具有一定的选择性，这一作用机制的重大发现使喜树碱重新成为抗肿瘤药物研究的热点，研究的重点是寻找具有潜在抗肿瘤活性、溶解性好并且毒副作用小的喜树碱结构类似物，合成了大量的衍生物。先后有伊立替康(irinotecan，CPT-11)于1994年在美国上市，用于治疗结直肠癌；拓扑替康(topotecan，TPT)于1996年获准上市，用于卵巢癌的治疗。除了上述两个药物之外，羟基喜树碱也在我国上市，主治结肠癌、胃癌、肝癌和胰腺癌等消化系统肿瘤。另一个喜树碱的衍生物9-硝基喜树碱(Orathecin)也即将被FDA批准用于胰腺癌的治疗。同时，9-氨基喜树碱也因为其在人类实体肿瘤方面表现出较好治疗效果，正进行临床试验。除了上述这些药物，还有12种其他的喜树碱类衍生物，这些化合物也表现出不同程度的抗癌活性。喜树碱的这些衍生物也被证明具有抗艾滋病疗效及化学杀虫效果。因此，可以预见喜树碱的使用范围将进一步扩大，喜树碱的全球需求量也会大幅增加。

目前从全球范围来看，喜树碱最大的两个生产国是中国与印度，其中印度的喜树碱主要是从印度产的一种铁青树科(青皮木科Olacaceae)马比木属植物Mappia foetida Miers(臭花马比木)中提取得到的；而在中国喜树碱则是由中国特产的一种植物喜树的果实喜树果中提取得到的，另外，分布在台湾地区的一种植物青翠枝中也含有喜树碱。

在我国，喜树碱主要从植物喜树的果实中提取得到，而喜树碱的来源受到了多方面的限制，一方面由于喜树果中的喜树碱含量很低，为万分之零点几到万分之十几；第二个方面，喜树果的采摘以及其中的喜树碱含量受到季节、区域的限制很大；第三，我国的喜树资源分布虽广，但是大部分地区的含量很低，所以多年来喜树碱产量有限，且生产成本高，国内外一直供不应求，导致国内外喜树碱价格一直居高不下。另外，由于喜树的很多部位均可用来提取喜树碱，尽管喜树的生长速度较快，喜树在全球大部分地区特别在中国仍面临着资源枯竭的危险。因此，寻找喜树碱的新来源迫在眉睫。

经过详细的文献调研，我们发现我国的一种茶茱萸科(Icacinaceace)假柴龙树属(Nothapodytes)的植物与国外报道(Phytochemistry，1972，11，3529-3531)的马比木属植物非常相像，该植物在我国产6种，其全株喜树碱含量比喜树根、茎高8～10倍，比喜树果实高2～3倍，广泛分布于云南、甘肃、四川、贵州、湖北、湖南、广西及广东等西南部地区。我们在湘西地区采集了该马比木(Nothapodytes pittosporoides)的根、茎、叶进行初步的提取检测，发现各部位均含有较高含量的喜树碱，该类植物是在我国发现的提取喜树碱的重要天然资源，且该资源丰富，具有很高的生产、经济价值。

国外文献(Phytochemistry，1972，11，3529-3531)报道了从马比木中提取喜树碱的方法，该方法首先将马比木的粉末用正己烷脱脂两次，然后用丙酮、甲醇分别低温萃取3次，将萃取液合并后旋蒸除去溶剂，所得产物在冰柜中保存一周后得到浅绿色固体，经多次重结晶后得到喜树碱晶体，总产率为0.11％。

该方法的主要不足是喜树碱的产率太低，只有0.11％；该方法采用低温溶剂浸泡的方法进行提取，每次都需将马比木粉末浸泡在溶剂中过夜，因此完成整个提取过程至少需要一周的时间；另外，该方法溶剂用量较大，造成喜树碱的提取工艺成本较高。因此该方法耗费时间长，成本高，收率较低，不适合于大生产。