[发明专利]芦丁和槲皮素－7－鼠李糖在制备抗肝炎药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种芦丁(rutin)和槲皮素-7-鼠李糖苷(qucertin-7-rhamnoside)在制备抗肝炎病毒药物或保健食品的用途。

背景技术

我国是肝炎病毒感染的高发区。我国乙肝病毒携带率为9.75％，约为1.2亿人。我国肝炎病毒携带者的数量在以每年平均250万人左右的速度迅猛增长。在这些肝炎病毒携带者中，慢性乙型肝炎患者近4000万人，部分病人可发展为肝硬化和肝癌，每年因此而致死人数高达30多万。肝炎病毒携带人群如此迅猛增加的原因主要有二个方面，一是传染途径多，传染机率大，造成新患者不断增加，二是治疗不科学，不规范，导致治愈率低。它已成为威胁我国人民健康的一个重要疾病。世界卫生组织也将其列为全球导致死亡的第九大疾病。

芦丁又称云香苷存在于多种植物中，优以豆科植物槐Sophora japonica L.花蕾(槐米)中含量最高[木村雅行，等。药学杂志(日)1984；104(4)：340]，我们从蓝萼香茶菜中也分得，是一种黄酮苷类化合物。芦丁具有维生素P样作用，能降低毛细血管通透性和脆性，促进细胞增生和防止血细胞凝聚以及抗炎、抗过敏、利尿、解痉、镇咳、降血脂等方面的作用。临床上芦丁主要用于高血压病的辅助治疗和防治因芦丁缺乏所致的其它出血症，同时还用于预防和治疗糖尿病及合并高血脂症。有研究表明芦丁可改善四氧嘧啶大鼠糖尿病肾病，其机制可能与抑制醛糖还原酶和氧自由基有关[姜宝红，等。芦丁对糖尿病肾病的防治作用。黑龙江医学，2005；29(12)：899-901]；芦丁能抑制HepG2细胞的生长，并诱发细胞凋亡[沈钦海，等。芦丁对HepG2细胞生长的影响，第三军医大学学报，2006；28(18)：1885-1887]。槲皮素-7-O-鼠李糖苷存在于萝摩科植物白前Vincetoxicum officinaleMoench叶[CA 70：65123g，1969]，蔷薇科植物李Prunus salicina Lindl.叶和果实中[CA94：61652b，1981]，我们从蓝萼香茶菜中分得，是一种黄酮苷类化合物。芦丁和槲皮素-7-O-鼠李糖苷对抗乙肝病毒作用尚未见相关报道。

发明内容

本发明的目的在于提出芦丁和檞皮素-7-鼠李糖在制备抗肝炎半筹不纳药物中的应用。

本发明采用HBsAg诊断试剂盒和HBeAg诊断试剂盒对芦丁和槲皮素-7-鼠李糖苷进行了抗乙肝表面抗原(HBsAg)和乙肝核心抗原(HBeAg)  试验，实验结果表明芦丁和槲皮素-7-鼠李糖苷都具有显著抗乙肝病毒作用，因此，可将芦丁和槲皮素-7-鼠李糖苷分别用于制备抗乙肝病毒的药物或保健食品。

芦丁和槲皮素-7-鼠李糖苷结构如下：

芦丁

槲皮素-7-鼠李糖苷

具体实施方式

下面通过实施例，对本发明作进一步说明。

芦丁和槲皮素-7-鼠李糖苷抗乙肝病毒试验

一、实验药物、试剂及材料

化合物：芦丁和槲皮素-7-鼠李糖苷。

立可读HBsAg诊断试剂盒(上海科华生物技术有限公司)

立可读HBeAg诊断试剂盒(上海科华生物技术有限公司)

细胞培养液(10％胎牛血清，0.03％谷氨酰胺，G418 390μg/ml，卡那霉素50U/ml，调pH至7.2)

细胞消化液(0.25％胰蛋白酶，用磷酸缓冲液配置)

HBV-DNA克隆转染人肝癌细胞的2.2.15细胞系(HepG2215)。

二、方法

对数生长期细胞(HepG2215)，调整细胞浓度为2×105个/ml，取100μl种96孔板；药物不同浓度稀释培养24小时后加药，8天后取上清测表面抗原(HBsAg)和核心抗原(HBeAg)。

(1)每孔加入待测标本50ul，设阴、阳性对照各2孔，每孔加入阴性对照(或阳性对照)各一滴，并设空白对照一孔。

(2)每孔加入酶结合物1滴(空白对照孔除外)，充分混匀，封板，置37度孵育30分钟；

(3)弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复五次后拍干；

(4)每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀，封板，置37度孵育15分钟；

(5)每孔加入终止液1滴，混匀；

(6)用酶标仪读数，取波长450nm，参考波长630nm，读取各孔读数。

三.结果(见表1，2)：

表1芦丁和槲皮素-7-O-鼠李糖对乙肝表面抗原(HBsAg)抑制活性