[发明专利]转pta基因提高百合抗蚜虫性的方法无效
申请号: | 200810039573.X | 申请日: | 2008-06-26 |
公开(公告)号: | CN101302519A | 公开(公告)日: | 2008-11-12 |
发明(设计)人: | 唐克轩;唐东芹;王月 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/82;C12Q1/68;A01H1/00;A01H5/00 |
代理公司: | 上海交达专利事务所 | 代理人: | 王锡麟;王桂忠 |
地址: | 200240*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | pta 基因 提高 百合 蚜虫 方法 | ||
1.一种转pta基因提高百合抗蚜虫性的方法,其特征在于:采用RT-PCR技术从半夏中克隆出半夏凝集素基因pta,构建含pta基因的植物表达载体,利用根癌农杆菌介导法,将pta基因导入百合并经过抗生素筛选获得转化植株;利用PCR技术检测外源目的基因pta的整合情况,抗虫性试验测定转基因植株的抗蚜性,最终获得抗蚜性提高的转基因百合植株。
2.根据权利要求1所述的转pta基因提高百合抗蚜虫性的方法,其特征是,包括如下具体步骤:
(1)采用RT-PCR技术获得半夏凝集素基因pta;
(2)将pta基因置于花椰菜花叶病毒35S启动子之后,构建成含pta基因的植物表达载体;
(3)将含pta基因的植物表达载体转化根癌农杆菌EHA105菌株,获得用于转化百合的含pta基因植物表达载体的根癌农杆菌菌株;
(4)利用所构建的根癌农杆菌菌株转化百合无菌苗叶片,经过抗生素筛选,获得经PCR检测的转基因百合植株;
(5)对获得的转基因百合植株进行抗虫性测定,最终获得抗蚜性提高的转基因百合植株。
3.根据权利要求1所述的转pta基因提高百合抗蚜虫性的方法,其特征是,所述的经PCR检测的转基因百合植株是指,分别设计合成pta基因核心片段的检测引物,进行DNA扩增,紫外线下观察到目的条带的阳性植株即为转基因百合植株。
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