[发明专利]一种固相合成西曲瑞克的制备方法

说明书

技术领域：

本发明涉及醋酸西曲瑞克(包括醋酸盐、三氟醋酸盐及游离肽)的制备方法，尤其是固相多肽合成西曲瑞克的制备方法。

背景技术：

中文名：醋酸西曲瑞克

英文名：Cetrorelix Acetate

结构式：

AC-3-(2-naphthyl)

-D-Ala-4-Chloro-D-Phe-3(3-Pyriclyl-D-Ala-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH2

分子式及分子量：C70H92N17O14CL 1430.1

Cetrorelix Acetate是一种促性腺激素释放激素，用于不孕症治疗之前刺激受调控的卵巢。主要治疗促性腺激素释放激素受体阻断。

LHRH拮抗剂Cetrorelix对子宫内膜癌细胞生长周期及周期相关蛋白的影响，探讨其抑制内膜癌细胞生长的机理

比利时制药公司Solvay公司宣布，公司开发的子宫内膜组织异位治疗药物西曲瑞克(Cetrorelix)已经进入III期临床阶段，有可能在2009年上市。

Cetrotide分子量只有1431，可能被肠胃道中酵素所破坏，不能口服，仅能皮下或肌肉注射，作用迅速，一小时内可达血清浓度高峰30ng/ml，half life约为一天。它对GnRH受体的结合力(binding affinity)大约比GnRH本身高出二十倍，即使和强化物中的buserelin相比也高出两倍。至于拮抗物以往最引人诟病的缺点——释出组织胺(histamine release)，引起过敏，已经大大减低，实验中发现至少要达到千倍于血清有效治疗量，才会释放以前拮抗物所释出组织胺的半量；临床上，在接受注射的位置，偶而会有一点红肿搔痒的皮肤反应，真正比较严重的全身过敏迄今只有一例报告，是一位卵巢癌病患在接受连续七个月的大剂量(10mg/day)注射后，血压降低，皮肤出现红疹，咳嗽，不过在二十分钟内很快恢复正常。

由于本身是属于拮抗物，cetrotide不会有使用初期的刺激反应，而且抑制LH的效果可以立即显现，所以临床上使用时间可以缩短，不必像以往使用强化物般，从上一个周期的黄体期即开始使用，可以在同周期逐渐接近可能排卵日前的72-120小时才开始使用，目前有两种使用方法：单一剂量注射法(single doseschedule)和多次剂量注射法(multiple dose schedule)。单一剂量给法是在排卵针剂刺激的第七天，采一次皮下注射cetrotide 3mg；多次剂量法则是提早两天，从第五天每二十四小时注射小剂量cetrotide 0.25mg，直到施打HCG为止。两种方法都可以有效抑制早发性黄体刺激素的上升(premature LH surge)，避免卵质过早黄体化，影响卵的质量。

Cetrotide的另一个优点是可以减少卵巢过度刺激的发生率，因为此药物属于GnRH antagonists，药理上会拮抗GnRH，FSH，LH所有功能，当然包括FSH的滤泡刺激功能和LH的类似HCG诱发卵巢排卵功能，进而降低过度刺激可能，根据报告可以将OHSS的比例由现在的5-6％压低成1-2％，大大减少了它的威胁，也减少了病患需要住院的可能，使得不孕治疗更具人性化。

Cetrorelix的合成分为固相合成以及液相合成二种方法，由于多肽序列中有多个特殊的氨基酸如D-Cit，3-D-吡啶丙氨酸，4-氯-D-苯丙氨酸在液相合成中片段的合成也相对较难，难以纯化，加上序列也比较长，几个片段组合而得到的产品纯度不易做高，所以液相法合成不太适宜Cetrorelix的合成，而固相合成有Boc法以及Fmoc/tBu法，Boc法使用氨甲基树脂，最后用HF进行树脂的切割，在工业应用上HF因为剧毒所以受到限制，所以我们采用比较成熟并且快速的Fmoc/tBu法合成Cetrorelix，在合成中采用最小保护原则，直接使用Fmoc-D-Cit作为原料合成多肽，避免了使用昂贵的带侧链保护的D-Cit原料，得到比较理想的合成结果。

本发明中一些常用的缩写具有以下含义；

Fmoc：芴甲氧羰基

tBu：叔丁基

HOBt：1-羟基苯骈三唑

HBTU：苯并三氮唑-N，N，N′，N′磷酸-四甲基脲六氟酯

DIC：N，N-二异丙基碳化二亚胺

DIEA：N，N-二异丙基乙胺

Leu：亮氨酸

Tyr：酪氨酸

Arg：精氨酸

D-Cit：D-瓜氨酸