[发明专利]一种透明质酸的包被方法无效
申请号: | 200810043549.3 | 申请日: | 2008-06-25 |
公开(公告)号: | CN101614735A | 公开(公告)日: | 2009-12-30 |
发明(设计)人: | 黄新明;吴冯波 | 申请(专利权)人: | 上海新波生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/531 | 分类号: | G01N33/531 |
代理公司: | 上海浦东良风专利代理有限责任公司 | 代理人: | 张劲风 |
地址: | 201201上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 透明 包被 方法 | ||
技术领域:
本发明涉及透明质酸定量检测技术领域。
背景技术:
透明质酸定量检测试剂盒采用竞争免疫分析法。透明质酸(HA)包被于96孔荧免板,校准品或样品中的HA与固相表面HA竞争结合限量的生物素标记透明质酸结合蛋白(HABP-Biotin)。充分反应后,通过洗涤分离微孔表面HA结合的HABP-Biotin与未结合HABP-Biotin,再加入铕标记链亲和素(SA-Eu3+),使之与微孔表面的HABP-Biotin结合。洗涤,加入荧光增强液,微孔表面免疫复合物中的Eu3+被荧光增强液解离并形成稳定的荧光配合物,荧光强度与校准品或样品中的HA浓度呈负相关,根据已知HA浓度的系列校准品的荧光强度可得到剂量-反应曲线,通过剂量-反应曲线可得出未知样本的HA浓度。
对于透明质酸对荧免板的包被,由于透明质酸属于一强亲水性物质,其分子缺少疏水性官能团,因此透明质酸对常规荧免板的吸附性能不够理想,影响透明质酸的检测,尤其是标本中高浓度透明质酸的准确检测。本发明提出了一种新的透明质酸包被方法,该方法可显著改善透明质酸对荧免板的吸附性能。
发明内容
本发明的目的是提供一种透明质酸的包被方法,本发明主要是克服聚苯乙烯材质的荧免板板条在包板时对透明质酸的吸附性能不理想,影响透明质酸定量检测试剂盒的质量。
本发明的技术方案是:一种透明质酸的包被方法,包括以下步骤:
1、将聚苯乙烯材质的板条放置于阳光下照射24-96小时;
2、将透明质酸用包被液稀释至5-20ug/mL作为包板工作液,包被反应板,并用封闭液封闭。
本发明的有益效果是:本发明对板条进行预处理,使得其对透明质酸的吸附性能得到明显提升,显著提高了透明质酸定量检测试剂盒的质量。
附图说明:
图1为本发明板条接收阳光照射时间和检测方法荧光强度之间的关系图
具体实施方式
下面参照图1,通过实施例对本发明作进一步说明。
实施例
透明质酸定量检测试剂盒板条的包被
首先将聚苯乙烯材质的板条放置于阳光下照射0、12、24、48、72、96小时;
11包被液的配制
1.1.1配方
1.1.2配制过程
室温条件下,在1000mL的纯化水中加入3.18g碳酸钠,5.88g碳酸氢钠和9g氯化钠搅拌子搅匀,PH计测PH值应在9.5±0.1以内。
1.2封闭液的配制
1.2.1配方
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