[发明专利]一种禽传染性支气管炎病毒S1基因与禽IL－2基因共表达DNA疫苗pIRES－S1/IL2

说明书

[技术领域]本发明涉及动物医药生物工程领域，是一种禽传染性支气管炎病毒S1基因与禽IL-2基因共表达DNA疫苗pIRES-S1/IL2。

[背景技术]禽传染性支气管炎(Avian Infectious Bronchitis，IB)是冠状病毒科冠状病毒属的禽传染性支气管炎病毒引起的鸡的一种急性、高度接触性的传染病，其特征为病鸡出现呼吸道症状、产蛋数量和品质下降以及肾脏病变等。禽传染性支气管炎病毒可感染所有日龄的鸡，导致生长迟缓、死亡、增重和饲料报酬降低；还常常引起霉形体混合感染以及大肠杆菌病等继发感染而提高鸡群的死亡率，给养鸡生产带来巨大损失。目前，该病呈世界广泛流行，是严重危害世界养禽业的重大传染病之一。

禽传染性支气管炎病毒是冠状病毒科冠状病毒属的代表种，其抗原性异常复杂，目前世界上分离的临床毒株已超过100多株，分属30种以上血清型。禽传染性支气管炎病毒属于单股正链的RNA病毒，基因组全长27.6kb，主要编码三种结构蛋白：纤突蛋白(S)、膜蛋白(M)、核蛋白(N)。许多研究表明，S蛋白裂解为S1和S2两个亚单位，其中S1蛋白可诱导产生中和抗体和血凝抑制抗体，为IBV的主要免疫原。N蛋白携带着T细胞表位，在免疫和保护上可能发挥作用。M蛋白的免疫原性较低，也有报道M蛋白上可能存在着具有重要免疫作用的抗原决定簇，能诱导细胞介导的免疫反应(参见：殷震，刘景华等.动物病毒学(第二版).北京：科学出版社，1997)。

禽传染性支气管炎病毒不同毒株在毒力、致病性和组织嗜性上存在着很大差异，不同血清型毒株之间交叉保护力弱。在防制上，常规单一毒株疫苗常有免疫失败的报道，多价疫苗可较好解决防治问题。灭活疫苗安全性好，不存在散播病原和毒力返强的问题，且能激发良好的体液免疫反应。其不足之处是使用剂量大，需要配合佐剂，制备比较复杂，因而成本较高。加之灭活疫苗不能诱发机体产生细胞免疫，而一系列的研究证实在IBV的免疫保护中，体液免疫和细胞免疫占有重要地位(参见：王红宁主编.禽呼吸系统疾病.北京：农业科技出版社，2002；BW卡尔尼克主编.禽病学(第九版).北京：北京农业大学出版社，1991，407-418；Kusters J G，Niesters，H G M，et al.Virology，1989，169：217-221；AvellanedaG E，Villeges P，Jackwood M W，et al.Avian Dis，1994，38：589-597)。随着禽传染性支气管炎病毒流行病学调查、分子生物学研究、免疫机制等研究的逐步深入，构建该病毒的主要结构蛋白基因的真核表达载体，研制DNA疫苗用于该病预防具有重要意义。