[发明专利]一种利用酒精废水发酵生产印染废水染料专属生物脱色菌剂的方法

权利要求书

1、一种利用酒精废水发酵生产印染废水染料专属生物脱色菌剂的方法，其特征在于包括以下步骤：

a、取印染厂废水池污泥，用玻璃珠打散，加100mL无菌水搅匀；

b、各吸取5mL加入富集培养基中，28℃静置富集培养3d；

c、而后过滤培养液，将滤渣点种于固体培养基上，28℃培养3d；

d、用挖块法接种于染料浓度为30mg·L^-1培养液中，28℃驯化培养5d；

e、再进行驯化富集培养2～3代；

f、选取有脱色的菌液，涂布法接种于染料培养基上，28℃培养3～5d；

g、挑取脱色圈周围的菌接种于相应的含50mg·L^-1染料培养液培养3d；

h、把脱色液接种到驯化的固体培养基上，划线分离，经多次纯化，获单株脱色菌；

i、生物脱色菌种子扩大培养，将单株脱色菌接种到100ml灭菌细菌培养基中，置30℃，转速180r/min的摇床上通气培养24h；

j、发酵罐发酵生产印染废水染料专属生物脱色菌，以稀释8倍的酒精废水为原料，添加少量的淀粉4.0g/L，脲0.5g/L，KH₂PO₄ 2.0g/L，K₂HPO₄ 5.0g/L，50mg·L^-1染料，PH调节至7.2，经121℃，30min灭菌后，按1％~4％(w/w)的比例接种入液体种子，于30℃，200r/min条件下，通气发酵72h后放罐。

2、根据权利要求1所述的一种利用酒精废水发酵生产印染废水染料专属生物脱色菌剂的方法，其特征在于：所述的富集培养基配方为酵母膏1g，蛋白胨2g，牛肉膏1g，葡萄糖10g，蒸馏水1L，PH＝7.0，生物脱色菌固体培养基配方为牛肉膏0.05％，蛋白胨0.1％，NaCl 0.05％，pH＝7.0，生物脱色菌染料培养基是在固体培养基中加入染料成含染料培养基。

3、根据权利要求1所述的一种利用酒精废水发酵生产印染废水染料专属生物脱色菌剂的方法，其特征在于：所述的脱色菌种子扩大培养采用灭菌细菌培养基培养，配方为1∶2牛肉浸液2/3，蛋白胨1％，NaCl 0.5％，蒸馏水1/3，染料50mg·L^-1，PH＝7.2。

4、根据权利要求1所述的一种利用酒精废水发酵生产印染废水染料专属生物脱色菌剂的方法，其特征在于：所述的生物脱色菌扩大培养采用灭菌培养基培养，配方是以稀释8倍的酒精废水为原料，添加少量的淀粉4.0g/L，脲0.5g/L，KH₂PO₄ 2.0g/L，k₂HPO₄ 5.0g/L，50mg·L^-1染料，PH调节至7.2。

5、根据权利要求1所述的一种利用酒精废水发酵生产印染废水染料专属生物脱色菌剂的方法，其特征在于：所述的用发酵罐发酵生产印染废水染料专属生物脱色菌，是指用酒精废水稀释8倍后，添加少量的碳、氮、磷及染料制成培养基，经121℃，30min灭菌后，按1％~4％(w/w)的比例接种入液体种子，于30℃，200r/min条件下，通气发酵72h后放罐。

6、根据权利要求1所述的一种利用酒精废水发酵生产印染废水染料专属生物脱色菌剂的方法，其特征在于：所述的步骤i中灭菌细菌培养基为，1∶2牛肉浸液2/3，蛋白胨1％，NaCl 0.5％，蒸馏水1/3，染料50mg·L^-1，PH＝7.2。