[发明专利]基于MSO电子基因芯片的汞离子的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及基因芯片检测技术，特别是一种基于MSO电子基因芯片的检测汞离子的方法。

背景技术

众所周知，汞离子具有剧毒。汞离子在有机体的累积会破坏DNA，影响肝脏和肾脏的正常工作，破坏免疫系统的平衡，甚至导致死亡。因此，检测饮用水、食物、空气和水的汞离子的污染就显得越来越重要，也发展了一系列的检测汞离子的光学方法。然而，很多关于汞离子的荧光传感器是基于小的有机分子上，只在有机媒介下起作用。由于小的合成分子缺少水解性，金属离子在有机溶剂中易形成螯合物，由于他们的强水解性，在水解状态下很难被识别。并且，目前的探测器不能很好地区分出其它非特殊的金属离子，例如：Ca²⁺，Mg²⁺，Pb²⁺，Cu²⁺，Zn²⁺，Mn²⁺和Co²⁺离子。

发明内容

为了在水解状态下有效探测汞离子，并且区分出其它金属离子，本发明采取的技术方案是：

一种基于MSO电子基因芯片的汞离子的检测方法，所述检测方法包括：利用无标记特殊离子寡核苷酸探针对汞离子进行探测，寡核苷酸的分子式为5’-CATTTCTTTCTTCCCCTTGTTTGTTTCA-3’，简称为MSO，MSO探针富含胸腺碱，胸腺碱简记为T，汞离子存在的时候，易于与胸腺碱形成化合物T-Hg²⁺-T；聚合物3-(3’-氮，氮，氮-三乙基-1’-异丙基)-4-甲基2，5-盐酸噻吩，简称为PMNT。PMNT的阳离子水解显示黄色。

具体步骤如下：

5μL的MSO溶液中加入5μL的500μM的PMNT，生成关于静电复合物MSO/PMNT的水溶液。水溶液颜色由黄色变为红色。

用浓度为0.5％的硝酸水解Hg(NO₃)₂作为备用溶液得到Hg²⁺，添加HNO₃使得水溶液的PH值为6.0以防止HgO粒子的形成。

1μL的浓度为12.5μM含有Hg²⁺的备用溶液加入到上述制备的MSO溶液与PMNT溶液的混合液，一分钟后用肉眼就可以观察到水溶液为由红色到黄色变化。

在以上相同的实验条件下，Ca²⁺，Mg²⁺，Pb²⁺，Cu²⁺，Zn²⁺，Mn²⁺和Co²⁺离子，即使其水溶液浓度增加到前面所述的汞离子水溶液浓度的500-1000倍，也不会导致PMNT与MSO的混合水溶液的颜色的特殊变化。

所有的水解液由MilliQ水配制。

上述反应在室温下进行。

本发明的有益效果是：首先，水解共轭聚合物-PMNT提供了一种“混合探测”的方法，可以快速完成水解状态下汞的探测。第二，易于和汞离子反应的寡核苷酸探针的应用使得传感器具有非常好的识别性。第三，与以前的研究比较，这种探测器不需要依赖于寡核苷酸的荧光表，这样可以减少很多成本。

附图说明

图1：汞离子检测实验原理图。

具体实施方式

一种基于MSO电子基因芯片的汞离子的检测方法，所述检测方法包括：利用无标记特殊离子寡核苷酸探针对汞离子进行探测，寡核苷酸的分子式为5’-CATTTCTTTCTTCCCCTTGTTTGTTTCA-3’，简称为MSO，MSO探针富含胸腺碱，胸腺碱简记为T，汞离子存在的时候，易于与胸腺碱形成化合物T-Hg²⁺-T；聚合物3-(3’-氮，氮，氮-三乙基-1’-异丙基)-4-甲基2，5-盐酸噻吩，简称为PMNT。PMNT的阳离子水解显示黄色。

具体步骤如下：

5μL的MSO溶液中加入5μL的500μM的PMNT，生成关于静电复合物MSO/PMNT的水溶液。水溶液颜色由黄色变为红色。

浓度为0.5％的硝酸水解Hg(NO₃)₂作为备用溶液得到Hg²⁺，添加HNO₃使得水溶液的PH值为6.0以防止HgO粒子的形成。

1μL的浓度为12.5μM含有Hg²⁺的备用溶液加入到上述制备的MSO溶液与PMNT溶液的混合液，一分钟后用肉眼就可以观察到水溶液为由红色到黄色变化。