[发明专利]一种魔芋的开放式组织培养方法

说明书

技术领域

本发明属于植物快繁领域，特别涉及一种魔芋的开放式组织培养方法。

背景技术

魔芋属于天南星科魔芋属多年生草本植物，因其是世界上唯一高含葡甘聚糖的植物而引起世界的广泛关注。目前魔芋在全国的种植面积约120万亩，主要分布在湖北、湖南、云南、贵州、四川、陕西等省的边远山区，种植魔芋是引导当地农民脱贫致富奔小康的一条重要途径，也是很多地方政府调整农村产业结构的主要经济作物。

魔芋的组织培养技术研究起始于1980年，但到2000年以后才逐步得到发展，魔芋组织培养技术的应用，一是解决现阶段魔芋种芋严重不足的问题，二是解决魔芋种芋繁殖速度慢、新品种推广速度慢的问题，三是解决魔芋种芋由于病毒积累退化严重的问题，这在推动魔芋产业的发展中起到了不可忽视的作用。

植物组织培养发展至今，它的理论研究已相当精深，但技术环节还存在不少问题。传统组培过程繁杂，是围绕防止污染而制定的，控制污染成了组培中的首要技术，不能把污染率降低到可以接受的范围，也就意味着这项工艺不能进行下去。而影响污染的因素多种多样，如外植体的种类、取材的季节、时间、预处理方法、消毒药剂的种类、浓度、消毒时间以及消毒方法、培养基和器皿灭茵、操作人员、工作环境的要求、超净工作台的工作质量等都与污染密切相关，因此，使得污染问题十分复杂，也很难防治，成为限制组培产业化的重要原因之一。

组培过程中的污染，主要表现为培养基的污染，营养丰富的培养基为细菌、真菌提供了适宜的滋生场所。因此，只要将培养基改造成既保证植物组织正常生长，又具有杀菌、抗菌功能的培养基，菌类一旦失去滋生场所，就不会对组培过程造成危害。解决污染问题，使组培过程无需严格的无菌环境，从根本上简化组培环节，进行开放式组织培养是完全可能的。而改造培养基的关键是要找到一种能够添加到培养基的广谱性杀菌剂。2000年以来，相关科研单位围绕杀菌剂的研制和使用、简化组培环节、降低组培成本，建立了一套完整可行的开放式组织培养模式(以下简称“开放组培”)做了大量的研究工作，并在马铃薯、香蕉等几十种植物组培上获得了成功，该项技术必将推广应用到其他植物。

在组培快繁技术的应用上，不同作物培养的技术难度大不一样，魔芋相对马铃薯来说要复杂得多，一是马铃薯以茎尖作外植体，不存在内生菌在继代培养中污染的问题，魔芋起始培养采用球茎或根状茎作外植体，含有大量的内生菌，会在继代培养中表现出来；二是马铃薯试管苗形成后通过切段繁殖，扩繁不通过愈伤组织阶段，生长速度快，一般20天为一个繁殖周期，可以多次繁殖；魔芋扩繁必须通过愈伤组织阶段，生长速度较慢，继代周期较长，切块扩繁一次一般需30-45天，且1块只能切3-4块，继代5-6次以后，分化能力逐渐减弱，需重新进行起始培养；三是用于马铃薯扩繁的培养基成分较魔芋培养基简单，一般不加激素，甚至不需加有机物，使杂菌污染的几率大为减少，因此，针对不同的作物，需要研究相应的开放式组织培养技术，才能实际应用。

发明内容

本发明的目的是针对现行的组培快繁方法不足进行改进，提供一种魔芋的开放式组织培养方法。

本发明的目的是这样实现的：一种魔芋的开放式组织培养方法，其待征在于快速培养过程中包含有如下步骤：

a.接种：采用魔芋的组织作外植体，接种到魔芋培养基中，扩繁到一定数量后取出；

b.分化培养：将接种后的魔芋组织放入分化培养基中，使组织大量分化出芽胞，从芽胞中分化丛生芽，同时长根；

c.再分化培养：将分化出丛生芽的魔芋组织放入再分化营养液中进行培养，使其从异养型转变为自养型；

d.移栽：将完整的魔芋植株移栽到苗床。

本发明进一步地魔芋的开放式组织培养方法，其中包含有下步骤：

a.接种：采用魔芋的具有生命力的组织作外植体，接种到魔芋培养基中，使原组织体积膨大2倍-3倍。魔芋培养基的组成中含有：MS+6-BA1.5mg/L-3.0mg/L+NAA 0.1mg/L-0.5mg/L+IBA 0.5mg/L-1.0mg/L+30％蔗糖。

b.分化培养：将接种后的魔芋组织放入分化培养基中，使组织大量分化出芽胞，在适当的温度和光照条件下，从芽胞中分化丛生芽，同时长根。魔芋分化培养基的组成中含有：MS+6-BA 1.5mg/L-3.0mg/L+NAA 0.1mg/L-0.5mg/L+IBA0.5mg/L-1.0mg/L+KT1mg/L-5mg/L+30％蔗糖。