[发明专利]一种动物尿液中SAL的快速检测方法

说明书

(一)技术领域

本发明涉及一种动物尿液中SAL的快速检测方法。

(二)背景技术

SAL(Salbutamol，沙丁胺醇)，化学名称为1-(4-羟基-3-羟甲基苯基)-2-(叔丁氨基)-乙醇，是一种选择性β-受体激动剂，有较强的支气管扩张作用，临床上被广泛应用于人类哮喘和心脏病的治疗，但是在高于治疗剂量长期服用SAL时可使动物体内的营养成分由脂肪组织向肌肉组织转化，减少脂肪沉积和促进动物生长，提高饲养动物的瘦肉率。

随着对“瘦肉精”(盐酸克伦特罗)的监察和检测力度的增大，一些非法使用者开始转向其它替代品。由于SAL的结构和“瘦肉精”相似，都属于β-受体激动剂，所以它们的促生长作用也相差不大；同时又由于SAL在动物体内消除的时间比“瘦肉精”短，毒性较弱，因此SAL成为“瘦肉精”最主要的替代品，但药物通过代谢易在动物体内集聚残留，并可通过食物链传入人体，会严重危害人类的健康，所以对SAL的检测和控制已势在必行。

目前国内对SAL的检测手段相对滞后，对SAL检测方法的研究也处于起步阶段，尚无动物体内此药物残留的统一的国家检测方法及标准。现行的检测方法多为定性的方法，从抗干扰、定量的准确程度方面都存在很大的问题。所用仪器昂贵、样品处理程序复杂、操作费时并需要专门的操作技能，其分析方法的灵敏度尚不能满足需要或大量监控的价格难以承受，且仪器体积较大，不适合做现场检测。

由药物在动物体内代谢过程可知，尿中的药物除少数有机酸、碱类药可以在近曲小管被主动分泌入尿外，大多数药物(游离部分)都是从肾小球以滤过方式，由血浆进入原尿中。随着尿液生成过程中的浓缩，尿药浓度逐渐升高，大多远远高出血药浓度，因此易于测定；其次，尿液也可无损伤收集，这也是在检测药物浓度时通常选尿液为检测标本的原因。此外，检测动物尿液中的药物含量，适用于动物的宰前控制，可有效地预防药物残留超标的动物食品流入市场，对保障动物食品的安全具有重大意义。但目前对尿液中SAL的定量方法尚无报道。

(三)发明内容

本发明的目的在于提供一种动物尿液中SAL的快速检测方法，以对动物体内的SAL浓度进行检测，同时克服了传统检测手段准确度低、操作繁琐、价格高以及不适合现场检测等缺点。

本发明采用的技术方案如下：

一种动物尿液中SAL的快速检测方法，调节尿样pH值为8.5-9.5，以正丁醇、异丁醇或乙酸乙酯为溶剂提取，分离出有机层后在其中加入β-环糊精和乙醇，浓缩至尿样取样体积后检测其荧光强度值，并根据公式I计算出尿液中SAL的浓度；其中尿样、提取溶剂与乙醇的体积比为1∶5-7∶0.006-0.008；加入β-环糊精的量为每升尿液加入0.0004-0.0006mol β-环糊精；公式I如下，其中y为荧光强度值，x(μg/mL)为尿样中的SAL浓度：

y＝1.1971x+1.8655。

由于尿液样品一般为微黄色，荧光检测时会对结果有影响，所以本发明先对尿液提取后再进行检测。本方法给出了最佳提取溶剂及其用量，其中提取溶剂又优选异丁醇；pH值的选择是考虑到在酸性条件下，SAL会生成相应的离子而影响提取，提取率极低，因此在碱性条件下提取；但是pH值过高也会影响提取率；其中，调节尿液pH值为9最为合适。β-环糊精作为增敏剂，可对与其极性相似、分子大小与其空腔相匹配的不同类型的分子形成包络物以屏蔽干扰。对提取后分出的有机层进行浓缩后，用荧光光度仪进行检测；较好的检测荧光强度值时激发光和发射光分别为280nm和310nm。

具体的，所述动物尿液中SAL的快速检测方法可按照以下步骤进行：调节尿样pH值为9，异丁醇提取后分离出有机层，在其中加入β-环糊精和乙醇，浓缩至尿样取样体积后在激发光和发射光分别为280nm和310nm条件下检测其荧光强度值，并根据公式I计算出尿液中SAL的浓度；其中尿样、异丁醇与乙醇的体积比为1∶6∶0.007；β-环糊精加入的量为每升尿液加入0.0005mol β-环糊精。

以上所述乙醇为无水乙醇。

本发明方法线性范围为0-20.0μg/mL，检出限为0.8ng/mL，精密度(用相对标准偏差表示)和回收率分别为1.3％和96.57％，。

本发明相对于现有技术，有以下优点：