[发明专利]杨梅素的制备新方法

说明书

技术领域

本发明是提供一种从葡萄科蛇葡萄属Ampelopsis Michx植物蛇葡萄(Ampelopsis sinica(Miq.)W.T.Wang)茎叶或其它葡萄科蛇葡萄属植物中提取制备药物原料杨梅素的新方法，属于中药、天然药物技术领域。

背景技术

蛇葡萄为葡萄科蛇葡萄属植物的茎叶。别名叫酸藤、山葡萄、爬山虎、野葡萄、烟火藤、山天萝、过山龙、母苦藤、酸古藤、禾黄藤、禾稼子藤、绿葡萄、假葡萄、水葡萄等。在恩施地区尤其是来凤大河镇盛产野生蛇葡萄。据《中草药汇编》、《广西药用植物名录》、《广东药用植物手册》、《上海常用中草药》等记载，该药性味甘淡、功效清热解毒，主治黄疸型肝炎、感冒风热、咽喉肿痛等。民间认为，大凡失音、中暑、口舌生疮、风火牙痛、便秘等症，泡开水饮用，有明显疗效；对马牙疳、脚丫湿疹等外敷也有一定疗效。目前从蛇葡萄中提取杨梅素的报道很少，现在利用的杨梅素大多都从杨梅中获得，用80％丙酮浸提，浸提液减压回收丙酮后过滤，滤液用石油醚萃取，水层以大孔吸附树脂柱层析处理，水冲洗后用甲醇洗脱，回收后得褐黑色浸膏。将甲醇洗脱物溶于水中，用Sephadex HL-20柱层析分离，含水甲醇梯度洗脱。所用的提取溶剂多数属于易燃、易爆危险品，且生产周期较长，成本也较高，对环境也造成污染，不适合大批量生产。本发明的特点在于提取过程使用了价格便宜的碱性溶液，促进二氢杨梅素向杨梅素的转化，提高了产率，生产工艺简单、生产周期短，安全、不污染环境，成本低，收率高，纯度高达95％以上，特别适合产业化大量生产。也为我们寻找新的药用植物资源奠定了基础。

杨梅素(myricetin)的结构

发明内容

本发明的目的之一是解决了天然界植物中杨梅素的含量少，提取分离困难，提供了一种从蛇葡萄及同属植物中提取高纯度杨梅素的方法。

本发明的目的之二是提供了一种不使用大孔树脂，是合理的使用了碱性溶液促进二氢杨梅素向杨梅素结构转化，从而制备杨梅素的方法，减少了对环境的严重污染问题，并且具有操作简单、周期短、纯度高的特点，杨梅素的含量可达95％，如果反复重结晶含量可高达99％。

本发明的目的之三是提供了一种由二氢杨梅素转化杨梅素的制备新方法并适合产业化生产。本发明的积极有益贡献是制备的杨梅素具有较强的抑制黄嘌呤氧化酶的作用(本发明人已申请专利，申请号：200810050747.2)，未经转化的二氢杨梅素不具有这种活性的，根据黄嘌呤氧化酶抑制剂的构效关系：黄烷酮、二氢黄酮和黄烷醇由于缺少C2-C3之间的双键而不具有抑制黄嘌呤氧化酶的活性(中草药来源的黄嘌呤氧化酶抑制剂的研究进展，中药材，2006，29(12)，1386-1389)，并且杨梅素具有很强的抗氧化活性，明显提高SOD的活性，降低MDA的含量，提高脑系数。开拓了医药新用途，并为蛇葡萄属的进一步开发奠定了基础。

本发明是通过以下方法实施的：将蛇葡萄或其它葡萄科蛇葡萄属植物原料药材用水溶液或含水的乙醇、甲醇溶液(碱性溶液调解PH7.5-14)提取一次或多次，趁热过滤，合并提取液，浓缩，用稀酸调PH为2-8，析晶，得粗提物；粗提物用乙醇、甲醇或丙酮提取一次或多次，过滤，合并滤液，用0.5-2％(W/V)的活性炭脱色，回收溶剂，析晶，得杨梅素晶体。

本文所指蛇葡萄为葡萄科蛇葡萄属植物，其嫩叶经过杀青、揉捻、烘干而成。提取溶剂为水或乙醇、甲醇的水溶液；所述加入的碱性溶液的目的为了促进结构转化，优化杨梅素的提取效果、减少杂质、提高纯度，其加入的方法可以是直接加入也可以是水溶液加入，使PH值为7.5-14之间。提取一次或多次，合并提取液，浓缩，用盐酸、硫酸或磷酸调PH值为2-8之间，析晶，用甲醇、乙醇或丙酮加热溶解，过滤，合并滤液，用0.5-2％(W/V)的活性炭脱色，回收溶剂，放置，析晶，得杨梅素晶体。

杨梅素粗提物提取时溶剂浓度为10％-95％；可以是乙醇也可以是甲醇或丙酮。

本发明的有益效果在于：在制备过程中以水、乙醇、甲醇或丙酮为溶剂，加入的碱性溶液、用的盐酸或硫酸均为医用试剂，成本低，污染小，提取工艺简单，生产周期短，收率高达5％以上，杨梅素的纯度可达95％以上。

本发明的上述方法可以用于产业化大量制备单体杨梅素。通过高效液相色谱和液-质联用进行分析，验证本发明方法制备的结晶物就是杨梅素。

1、高效液相(HPLC)分析