[发明专利]提高降压肽比活性的分离纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及多肽的分离纯化领域，更具体地说，是涉及一种提高降压肽比活性的分离纯化方法。

背景技术

多肽的分离纯化方法很多：如凝胶层析、离子交换层析和HPLC等，这些都能达到很好的分离效果，但是在工业生产过程中很难实现。1.上述分离方法得率低，会大幅度提高生产成本，很难达到工业生产标准，适合研究；2.上述分离方法相对复杂的多，这会大幅度提高技术难度；3.对设备要求也很高。随着多肽被越来越多的应用，其产业化分离纯化的实现显得尤为重要。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，克服现有技术中存在的不足，提供一种能够实现产业化的提高降压肽比活性的分离纯化方法。

本发明提高降压肽比活性的分离纯化方法，通过下述技术方案予以实现，将降压肽组分配成浓度为0.1～1mg/ml的水溶液进行超滤，采用采用超滤膜在0.1-0.15MPa压力下进行超滤，当超滤液达到原液3/4体积时结束。

本发明所述降压肽为大豆肽、玉米醇溶蛋白、玉米肽、花生肽、白蛋白多肽、绿豆肽中的任意一种。

利用超滤方法可以实现降压肽产业化分离纯化，并且大量实验结果发现超滤可以提高原料的活性，大幅度提高原料的比活性；当超滤液达到原液3/4体积时，分离纯化的效果比较好，同时提高超滤液中小分子量多肽的含量。下面以绿豆肽分离纯化的实验数据(表1)加以说明：

表1

具体实施方式

下面结合对本发明做进一步描述。

以绿豆肽分离纯化为例详述本发明：称取一定量的多肽粉，在蒸馏水中溶解成浓度为1mg/ml的多肽液，连接超滤装置(超滤膜包或超滤设备)，如用vivaflow超滤膜包超滤(超滤膜可以采用聚偏氟乙烯(PVDF)、聚砜、聚醚砜、聚丙烯、聚乙烯、醋酸纤维素等材料)或膜分离装置，在0.1-0.15MPa压力下，进行超滤分离，不同时间收集超滤组分和残留组分，然后在已建立好的酶筛选平台上测定ACE抑制活性，测定多肽浓度(具体数据见表2)，测定多肽分子量分布，进行氨基酸组成分析。

表2

利用上述方法分别测定大豆肽0.2mg/ml、0.5mg/ml、1mg/ml浓度多肽液进行超滤分离，不同时间收集超滤组分和残留组分，然后在已建立好的酶筛选平台上测定ACE抑制活性，测定多肽浓度(具体数据见表3)。

表3

通过选用不同浓度的多肽，不同种类的多肽，不同时间点的组分分析，结果发现，当超滤液达到总体积3/4时，酶活和比活性提高，特别是比活大幅度提高，显著降低组分的分子量，提高组分的功效活性和品质。本发明是一种基于酶、细胞和动物筛选平台的，适合于工业化生产的，多肽分离纯化和改善品质的研发工艺。