[发明专利]丙型肝炎病毒(HCV)IgM抗体快速检测试纸

权利要求书

1、一种丙型肝炎病毒(HCV)IgM抗体快速检测试纸，包括上样垫(1)、紧密连接于上样垫一端的含有标记HCV混合抗原的胶体金垫(2)、与胶体金垫的另一端紧密连接的硝酸纤维素(NC)膜(3)和紧密连接于NC膜另一端的吸样垫(4)，NC膜包被有相互分离的检测(T)线(5)和质控(C)线(6)，上样垫、胶体金垫、NC膜和吸样垫粘贴到塑料支撑板(7)上形成试纸条，试纸条亦可以装入塑料卡中形成卡式包装，其特征在于T线为包被在NC膜上的抗人IgM抗体，胶体金垫为标记的HCV混合抗原构成。

2、根据权利要求1所述的HCV IgM抗体快速检测试纸，其特征在于所述的HCV混合抗原为重组表达HCV的核心抗原(Core)和非结构蛋白(NS)3抗原，亦可选择性再加入HCV的NS4、NS5、E1和E2区抗原。

3、根据权利要求1所述的HCV IgM抗体快速检测试纸，其特征在于所述的上样垫为玻璃纤维膜或无纺布，吸样垫由吸水滤纸构成。

4、根据权利要求1和2所述的HCV IgM抗体快速检测试纸，其特征在于，所述的抗原的包被方法为：以0.01M pH 7.2磷酸盐缓冲液(PBS)将抗人IgM抗体配制成1mg/ml的溶液，用喷膜仪在NC膜下部以1ul/cm的参数进行划线，包被T线，同时在NC膜上部包被抗HCV抗体作为C线，划线后将NC膜在干燥间，温度20-25℃，湿度小于30％，干燥8-10小时。

5、根据权利要求1和2所述的HCV IgM抗体快速检测试纸，其特征在于，所述的混合抗原标记胶体金颗粒的方法为：以氯金酸-柠檬酸三钠还原法制备直径为30-50nm的胶体金溶液，制备完成后取100ml胶体金液放在烧杯内，用0.2M K₂CO₃调至pH8.0，按100ml胶体金溶液加入1mg HCV重组混合抗原，室温搅拌2小时，加入1％牛血清白蛋白(BSA)，0.1％聚乙二醇(PEG)20000封闭20min，12000r/m离心30分钟，弃上清，用胶体金工作液复溶至100ml，按1ml溶液铺22cm²的比例均匀地铺在玻璃纤维膜或无纺布上，再置干燥间，温度20-25℃，湿度小于30％，干燥2-4小时，制成胶体金垫。

6、根据权利要求1和3所述的HCV IgM抗体快速检测试纸，其特征在于所述的试纸的装配方法为：在干燥室内，温度20-25℃，湿度小于30％，取塑料支撑板板，将已包被的NC膜放置在塑料支撑板的中部粘贴，在NC膜T线一侧搭接胶体金垫，搭胶体金垫的1/3粘贴，在胶体金垫另一侧搭接粘贴上样垫，搭胶体金垫的1/5；在NC膜C线一侧搭接吸样垫，搭吸样垫的1/10；最后用裁剪机将贴好塑料板切成3mm或4mm宽的试纸条，切好的试纸条可以再装入塑料卡内，形成检测卡。

7、根据权利要求1所述的HCV IgM抗体快速检测试纸，其特征在于，检测方法为：将被检血清或血浆平衡至温室，将试纸条或试剂卡平放，在上样垫上加入50-100ul被检样品，样品溶解胶体金并在NC膜上层析，然后用肉眼直接观察在30分钟内C、T线的出现情况，并判定检测结果。