[发明专利]鸡白细胞介素－2微球新剂型的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物药物的制备技术领域，特别涉及一种鸡白细胞介素-2微球新剂型的制备方法。

背景技术

目前，鸡白细胞介素-2作为一种免疫调节剂，已广泛用于临床。鸡白细胞介素-2是一种天然免疫增强剂。它具有激活T细胞，促进和维持T细胞长期存活；促进B细胞分化及产生抗体、诱导干扰素产生等功能。重组鸡白细胞介素-2用于鸡，对疫苗具有良好的免疫增强效果。它能克服了其它常规佐剂所引起的毒性大、难吸收的缺点，而且还可以克服某些疾病引起的免疫抑制状态，减少养禽业中由于病原感染后引起的免疫抑制所导致的重大经济损失。

近年来，免疫抑制病大面积流行已经成了畜禽养殖业的主要威胁之一。因此，鸡白细胞介素-2等免疫调节因子受到了国内外学者的广泛关注。在兽医临床试验中，鸡白细胞介素-2在动物疫病防治方面也取得了满意的效果。

鸡白细胞介素-2都是以注射的途径给药有较好的治疗效果，多者每天需要注射1-2次，连用2-5天，给养殖业主的使用带来很多不便，因此将其制成饮水、口服制剂便成为人们追求的目标。如果在此方面有所突破，将会产生巨大的社会和经济效益。但直接将这些生物药物饮水、口服，由于胃肠道内酶的降解消化及肠道的吸收屏障，使其利用度很低，治疗效果较差。

因此，提供一种鸡白细胞介素-2微球新剂型的制备方法，有效防治各种鸡病原性疾病，是该技术领域科研人员急需开发的新课题之一。

发明内容

本发明的目的是为克服已有技术的不足之处，提供一种制备简单、应用方便、效果显著的鸡白细胞介素-2微球新剂型的制备方法，

一种鸡白细胞介素-2微球新剂型的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)将一定量的鸡基因工程白细胞介素-2溶解在水相缓冲溶液中，该溶液(A)的pH值为2.5-7.0，鸡基因工程白细胞介素-2的含量为1.0-10.0毫克/毫升；

(2)将上述含鸡白细胞介素-2的酸性溶液(A)加入到亲水亲油平衡值(HLB)为9≤HLB≤15的液态的非离子型表面活性剂溶液中，或双亲性油酯中，或他们的混合液中；所述溶液(A)与这些表面活性剂，或双亲性油酯，或他们的混合液的比例为1∶4至1∶40；该两种溶液在温度5-30℃下进行搅拌，使其均匀的混合在一起，成为一种透明的溶液(B)；

(3)将溶液(B)加入至亲水亲油平衡值为0≤HLB≤9的液态的油相中，或亲油性乳化剂中，或油相与亲油性乳化剂的混合液中，溶液(B)与其的比例为1∶1至1∶9，使这两种溶液在温度5-30℃下搅拌混合，最终成为一种透明的油相制剂(C)，在4-10℃下保存；

(4)为了保持溶液的稳定，加入一定量的稳定剂；稳定剂直接加入到所述制备步骤(1)溶液中，或者所述的步骤(3)中的溶液中。

所述步骤(2)中的表面活性剂，或双亲性油酯，或他们的混合液采用以下一种或两种以上混合：十甘油单辛酸酯、聚乙二醇-8-甘油辛酸/癸酸酯、吐温80。

所述步骤(2)中的搅拌温度为5-30℃、搅拌速度为100-1800转/分、搅拌时间为0.4-4小时。

所述步骤(3)中的亲油性溶液或乳化剂为：甘油油酸酯、聚甘油-3-油酸酯、聚乙二醇-6-甘油单油酸酯。

所述步骤(3)中的搅拌温度为5-30℃、搅拌速度为100-1800转/分、搅拌时间为0.4-4.0小时。

所述稳定剂选自海藻糖、牛血清白蛋白、鸡蛋清蛋白和聚乙二醇的一种或一种以上。

所述稳定剂的加入量为最终溶液的0.1％-10％。

所述鸡白细胞介素-2为重组鸡基因工程白细胞介素-2和鸡天然白细胞介素-2。

本发明方法的有益效果是：具有制备工艺简单，容易实现，应用方便，所需成本低等特点，该方法采用毒性小，口服安全的分散剂及油相等材料，使鸡白细胞介素-2均匀的分散溶解到油相中，最终成为一种透明的鸡白细胞介素-2油相制剂。采用该方法制成的油相制剂体外实验表明，它在不同的pH(2-11)溶液中，都能发生乳化作用，并且鸡白细胞介素-2基本上仍然包裹在油中而不进入水相。因此在饮水、口服时，能比较好的抵抗胃肠道酶的降解作用，且容易吸收，更好的发挥抗病毒药效。采用本发明方法制成的鸡白细胞介素-2微球，可使白细胞介素-2的包埋率提高到60-92％，在人工胃液中释放药物小于10％，在人工肠液中释放药物80％以上，可实现白细胞介素-2的肠定向释放。

具体实施方式

以下结合实施例，对依据本发明提供的具体实施方式详述如下：

实施例1