[发明专利]犬血清免疫球蛋白长效剂型的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物药物的制备技术，特别涉及一种犬血清免疫球蛋白长效剂型的制备方法。

背景技术

犬血清免疫球蛋白是犬产生的抗感染物质，抗体产生是犬在漫长演化过程中形成的对抗病原体入侵的最有效天然保护剂。具有抗体活性的免疫球蛋白与体内的免疫细胞和免疫器官一起共同构建动物机体免疫力的五大功能：防御功能、免疫稳定功能、免疫监视功能、修复功能、由浆细胞产生能与细菌、病毒产生特异性结合的免疫球蛋白。犬用免疫球蛋白的功能：提高仔犬免疫力，防止疾病感染；调节胃肠功能，防止营养性下痢；治疗常见的细菌、病毒性传染病。如传染性肝炎、犬瘟热、细小病毒病、痢疾。

目前，犬血清免疫球蛋白都是以注射的途径给药，通常有较好的治疗效果，但多者每天需要注射1—2次，连用2—5天，给养殖业主的使用带来很多不便，因此将其制成长效剂型便成为人们追求的目标。已有的犬血清免疫球蛋白存在需要长期频繁注射、使用不便、生物利用度低以及药物使用量大等缺陷。

因此，提供一种犬血清免疫球蛋白长效剂型的制备方法，有效预防和治疗各种畜、禽病毒性疾病，是该技术领域科研人员急需开发的新课题之一。

发明内容

本发明的目的是为克服已有技术的不足之处，提供一种制备简单、应用方便、效果显著的犬血清免疫球蛋白长效剂型的制备方法。

一种犬血清免疫球蛋白长效剂型的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)将一定量的犬血清免疫球蛋白溶解在含有稳定剂的PBS缓冲溶液，制成水相溶液(W1)，犬血清免疫球蛋白的含量为0.5—50毫克/毫升；

(2)将丙交脂/乙交脂共聚物用二氯甲烷溶解制成油相溶液(O)，丙交脂/乙交脂共聚物的含量为0.1—0.5克/毫升；将上述含犬血清免疫球蛋白的水相溶液(W1)加入到油相溶液(O)中，油相溶液(O)与水相溶液(W1)的比例为20∶1至2∶1，使这两种溶液在温度5—30℃下搅拌混合均匀，制成初乳W1/O，在4—10℃下保存；

(3)将聚乙烯醇充分溶解于水制成水相溶液(W2)，聚乙烯醇的重量浓度为0.5-50％；将上述初乳W1/O加入到水相溶液(W2)搅拌均匀，初乳W1/O与水相溶液(W2)的比例为1∶50至1∶200，制成复乳W1/O/W2，在4—10℃下保存；

(4)将复乳W1/O/W2转移到NaCl水溶液中，搅拌均匀，使有机溶剂挥发，然后离心收集微球；

(5)所述步骤(2)中的搅拌温度为5—30℃，搅拌速度为500—8000转/分，搅拌时间为0.02—0.2小时；

(6)所述步骤(3)中的搅拌温度为5—30℃，搅拌速度为100—3000转/分，搅拌时间为0.2—0.5小时；

(7)所述步骤(4)中的搅拌温度为5—30℃，搅拌速度为500—3000转/分，搅拌时间为0.2—0.5小时；

(8)为了保持溶液的稳定，加入一定量的稳定剂，稳定剂直接加入到所述制备步骤(1)溶液中。

所述稳定剂选自海藻糖、牛血清白蛋白和聚乙二醇的一种或一种以上。

所述稳定剂的加入量为最终溶液的0.1％—10％。

本发明方法的有益效果是：该注射用犬血清免疫球蛋白长效剂型能够减少犬血清免疫球蛋白用药次数，是一种理想的犬血清免疫球蛋白长效剂型。具有制备工艺简单，容易实现，应用方便，所需成本低等特点，该方法采用毒性小，注射安全的分散剂及油相等材料，使犬血清免疫球蛋白均匀的分散溶解到油相中，最终成为一种犬血清免疫球蛋白的长效剂型。采用该方法制成的犬血清免疫球蛋白的长效剂型体外实验表明，用畜、禽扰素为包裹对象，所制得的犬血清免疫球蛋白微球形态圆整，粒度分布均匀，粒径分布在40微米以下，载药量可达8.0％以上，包封率在30.0％以上，体外缓释可以达4周释药，符合长效制剂特征。一次注射后能够在较长时间内发挥抗病毒药效。将犬血清免疫球蛋白做成微球制剂，可以延长药物作用时间，大大提高药物疗效和经济效益。

具体实施方式

以下结合实施例，对依据本发明提供的具体实施方式详述如下：

实施例1

一种犬血清免疫球蛋白长效剂型的制备方法，其特征在于具体实施步骤如下：

(1)将90.0毫克犬血清免疫球蛋白溶解在2.0毫升含有2％的聚乙二醇4000的PBS缓冲溶液，制成水相溶液(W1)；

(2)将900.0毫克丙交脂/乙交脂共聚物溶解于2毫升二氯甲烷制成油相溶液(O)；