[发明专利]三次采油专用液体黄原胶的生产方法

说明书

技术领域

本发明属于微生物发酵和提取，具体的说是一种三次采油专用液体黄原胶的生产方法。

背景技术

目前黄原胶的制备是采用将生产菌种接种于以葡萄糖为主要碳源的无菌培养基中进行发酵，发酵过程是在规定的温度、pH条件下进行需氧发酵，生产菌种选用野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)，对发酵终产物进行提取得到专用液体黄原胶。上述现有技术存在使用在三次采油时不能透过滤膜，堵塞地层，降低了三次采油的采收率等缺点。

发明内容

本发明的目的在于提供三次采油专用液体黄原胶的生产方法，以实现现有专用液体黄原胶以实现黄原胶在三次采油时能透过5微米滤膜，不堵塞地层，提高三次采油的采收率的目的。

本发明的整体技术构思是：

三次采油专用液体黄原胶的生产方法，该方法包括如下工艺步骤：

A、将斜面菌种经扩大培养制成种子液；

B、将A步骤中制备的种子液按种子液：发酵培养基为8％-15％的接种量接入发酵培养基进行发酵，其中发酵培养基包括下列质量份的组分：

葡萄糖3.5％-4.2％  柠檬酸0.1％-0.2％    氢氧化镁0.15％-0.2％

硝酸铵0.2％-0.3％  硝酸钠0.1％-0.2％    磷酸氢二钾0.15％-0.3％

NaCl 0.05％-1％    FeSO₄ 0.05％-0.09％  硫酸镁0.1％-0.3％

硫酸锌0.025％-0.04％    有机硅消泡剂0.05％-0.3％

发酵培养基的配制方法为：先将柠檬酸加经过滤膜过滤的去离子水至完全溶解，再将发酵培养基中的其他各组分按氢氧化镁、硝酸铵、硝酸钠、磷酸氢二钾、NaCl、FeSO₄、硫酸镁、硫酸锌的顺序依次加入，溶解过程中每种组分完全溶解后再加入下一种组分，PH值为6.5-7.0；

发酵过程中的工艺条件为：

10小时内：温度28-34℃，压力0.03-0.05MPa，风量0.3-0.4vvm，pH值6.7-6.9；

10-20小时：温度28-34℃，压力0.03-0.05MPa，风量0.4-0.5vvm，pH值6.5-6.7；

20-30小时：温度28-34℃，压力0.03-0.05MPa，风量0.5-0.6vvm，pH值6.5-6.7；

30-40小时：温度30-34℃，压力0.03-0.05MPa，风量0.5-0.6vvm，pH值6.5-6.7；

40-60小时：温度30-34℃，压力0.03-0.05MPa，风量0.5-0.6vvm，40-45小时补入碳源——葡萄糖；有效控制菌种代谢过程中葡萄糖浓度为2-3％，以便快速稳定合成黄原胶；

60-70小时温度30-34℃，压力0.03-0.05MPa，风量0.5-0.8vvm，pH值6.8-7.0；

斜面菌种选用野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)；

C、将发酵完成后的发酵液经将成熟的发酵液经预处理加热灭菌，膜处理即得三次采油专用液体黄原胶。

本发明的各工艺步骤中的具体工艺条件是：

A步骤中斜面菌种经扩大培养制成种子液包括将斜面菌种制成摇瓶种子、将摇瓶种子制成一级种子、将一级种子制成二级种子，其中摇瓶种子的制备的工艺条件如下：

摇瓶种子培养液的包括如下质量份的组分：

葡萄糖1.0％-2.0％    酵母膏0.1％-0.3％    鱼胶原蛋白0.2％-0.4％

氯化钠0.1％-0.2％    牛骨蛋白胨0.2％-0.4％

摇瓶种子培养液的灭菌条件：蒸汽压力0.1-0.14Mpa、温度121-125℃、保持30-35分钟；

摇瓶种子的制备过程为：将接种针挑取一环斜面菌种中的原菌接入灭菌后的摇瓶种子培养液中，培养温度为28-34℃、转速为160-200转/分钟、培养周期为20-24小时进行振荡培养。

将摇瓶种子制成一级种子的工艺条件如下：

一级种子培养液包括如下质量份的组分：

葡萄糖1％-1.5％         酵母膏0.2％-0.3％    牛骨蛋白胨0.2％-0.3％

磷酸氢二钾0.1％-0.15％  NaCl 0.2％-0.3％     FeSO₄ 0.05％-0.08％

磷酸镁0.1％-0.15％      有机硅消泡剂0.1-0.3％