[发明专利]大蹼铃蟾非晶状体βγ－晶状体蛋白与三叶因子蛋白复合物和基因及制法及用途

说明书

技术领域：

本发明涉及一种大蹼铃蟾非晶状体βγ-晶状体蛋白与三叶因子蛋白复合物和基因及制法及用途，属生物医学领域。

背景技术

组织伤口修复是一个由血细胞，细胞外基质和多种细胞调节因子参与，交互作用的动态过程。组织伤口修复包括三个阶段：炎症反应，组织形成和组织再造。在炎症反应阶段，通过周围的受损的血管，从血清中释放各种生长因子，细胞因子和低分子量的小分子化合物，引起炎症反应，与受损血管周围的细胞外基质相互胶联，凝结，形成一道防御外界微生物的屏障，也作为早期创伤修复过程中生长因子作用的支架。同时，释放的各种生长因子和细胞因子能够启动伤口修复中的细胞增殖和迁移。在组织形成和组织再造阶段，在各种生长因子和细胞因子的作用下，在伤口周围出现由新形成的毛细血管长出物组成的肉芽组织，最终肉芽组织结痂，形成疤痕，修复伤口。

最新研究表明，组织伤口修复反应与肿瘤发生过程有密切关系，肿瘤生长也可以被视为一种不受调节的组织修复过程。在正常的组织中，组织修复反应被诱导发生，在完成损伤组织修复后，它能够被调控停止下来。但是在有致癌性的突变的情况下，最初的肿瘤生长被认为是对组织的损害而激发组织修复反应的发生。这就导致了一个恶性循环：组织修复产生的细胞会被用于肿瘤团的生长，而更大的肿瘤团将被认为是更大的组织损害，从而导致组织修复反应提供更多的细胞用于肿瘤的生长。如果能够鉴定出启动因子信号及其负控制因子信号，就能试着去中和它，从而阻止肿瘤组织修复程序，进而也能帮助来抑制或阻止肿瘤的生长。因此，寻找肿瘤所利用的触发组织修复反应的重要启动因子信号及其负控制因子信号成为目前和未来的肿瘤研究的热点方向之一。

脊椎动物中，晶状体蛋白(crystallin)是眼球晶状体的结构蛋白(C.T.Morner于1893年最早发现)，决定了晶状体的折光性和通光性。晶状体蛋白分为α和βγ两大类，α-晶状体蛋白属于广泛分布的小的热休克蛋白质家族。βγ-晶状体蛋白具有特征性的希腊钥匙模体(Greek key motifs)，每个模体由40个氨基酸残基组成，而两个结构模体可通过不对称性排列形成一个结构域，故将它们归为βγ-晶状体蛋白超家族。除了晶状体外，非晶状体βγ-晶状体蛋白质(non-lens βγ-crystallin)广泛分布在其他组织中。在微生物中，非晶状体βγ-晶状体蛋白质主要为压力诱导表达的相关蛋白质。例如Protein S和Spherulin3a。Protein S是一种来源于土壤中革兰氏阴性细菌Myxococcus xanthus的孢子专一蛋白，当处于营养缺乏的恶劣条件下，Protein S被诱导大量分泌表达，并结合钙离子通过寡聚化作用在细菌表面组装形成多层衣壳，在恶劣条件下保护自身。Spherulin 3a，来源于细菌Physarum polycephalum的囊泡形成蛋白，在各种压力环境下合成，参与形成胞囊和休眠。在脊椎动物中，已知的非晶状体βγ-晶状体蛋白质包括ep37和AIM1。EP37(epidermis-specific protein 37，表皮分化蛋白37)是表达在两栖动物Cynopspyrrhogaster(日本蝾螈，潮汕蝾螈或称赤腹蝾螈)的胚胎表皮，皮肤腺和胃表皮细胞中的蛋白质。黑色素瘤缺失蛋白1(AIM1，absent in melanoma 1)，为一类首先在人黑色素瘤疾病模型中缺失的与肿瘤抑制相关的新基因。AIM1在哺乳动物的胚胎发育过程中时空特异性的表达调节，具有不同大小的转录本，在成体中AIM1大量表达于皮肤，肺，心脏，肝和肾等器官，认为是一个潜在的肿瘤抑制基因。尽管EP37蛋白和AIM1基因被认为可能参与表皮发育和肿瘤抑制，但是目前对于他们的分子特性，生理功能和分子作用机制还知之甚少。