[发明专利]一种快速提取真菌DNA的SLS裂解液及其应用无效

专利信息
申请号: 200810059177.3 申请日: 2008-01-16
公开(公告)号: CN101230344A 公开(公告)日: 2008-07-30
发明(设计)人: 陈广进;李红叶;张志芳 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 杭州天勤知识产权代理有限公司 代理人: 胡红娟
地址: 310029浙江省杭州*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 快速 提取 真菌 dna sls 裂解 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种快速提取真菌DNA的SLS裂解液,其特征在于:由以下组分组成(以溶液总体积计):

N-月桂酰肌氨酸钠    1~3g/100ml

Tris-HCl            150~300mmol/L

NaCl                150~300mmol/L

EDTA                50~100mmol/L

水                  余量

PH值为7.5~8.5。

2.根据权利要求1所述的SLS裂解液的应用,包括以下步骤:

(1)将真菌菌丝加入SLS裂解液中,在50~80℃下水浴加热10~15min后离心;

(2)将萃取剂加入步骤(1)离心所得的上清液中抽提DNA,再次离心;

(3)将DNA沉淀剂加入步骤(2)离心所得的上清液中混合均匀,静置后离心沉淀DNA;

(4)将DNA沉淀用70%~75%的乙醇洗涤后干燥。

3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述的步骤(2)中萃取剂为氯仿和异戊醇的混合溶剂或为苯酚、氯仿和异戊醇的混合溶剂。

4.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述的步骤(2)中萃取剂与步骤(1)离心所得的上清液体积比为1∶1~2∶1。

5.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述的步骤(3)中DNA沉淀剂为无水乙醇或异丙醇。

6.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述的步骤(3)中DNA沉淀剂加入步骤(2)离心所得的上清液体积比为2∶1~3∶1。

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