[发明专利]一种快速提取真菌DNA的SLS裂解液及其应用无效
申请号: | 200810059177.3 | 申请日: | 2008-01-16 |
公开(公告)号: | CN101230344A | 公开(公告)日: | 2008-07-30 |
发明(设计)人: | 陈广进;李红叶;张志芳 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 | 代理人: | 胡红娟 |
地址: | 310029浙江省杭州*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 提取 真菌 dna sls 裂解 及其 应用 | ||
1.一种快速提取真菌DNA的SLS裂解液,其特征在于:由以下组分组成(以溶液总体积计):
N-月桂酰肌氨酸钠 1~3g/100ml
Tris-HCl 150~300mmol/L
NaCl 150~300mmol/L
EDTA 50~100mmol/L
水 余量
PH值为7.5~8.5。
2.根据权利要求1所述的SLS裂解液的应用,包括以下步骤:
(1)将真菌菌丝加入SLS裂解液中,在50~80℃下水浴加热10~15min后离心;
(2)将萃取剂加入步骤(1)离心所得的上清液中抽提DNA,再次离心;
(3)将DNA沉淀剂加入步骤(2)离心所得的上清液中混合均匀,静置后离心沉淀DNA;
(4)将DNA沉淀用70%~75%的乙醇洗涤后干燥。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述的步骤(2)中萃取剂为氯仿和异戊醇的混合溶剂或为苯酚、氯仿和异戊醇的混合溶剂。
4.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述的步骤(2)中萃取剂与步骤(1)离心所得的上清液体积比为1∶1~2∶1。
5.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述的步骤(3)中DNA沉淀剂为无水乙醇或异丙醇。
6.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述的步骤(3)中DNA沉淀剂加入步骤(2)离心所得的上清液体积比为2∶1~3∶1。
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