[发明专利]一种具有抗乙肝病毒活性的脂质纳米粒及应用

说明书

技术领域

本发明属纳米粒的应用，主要涉及一种负载了抗病毒药物的脂质纳米粒及其在制备抗乙肝病毒药物中的应用。

背景技术

病毒性疾病作为传染性疾病已经成为人类健康的主要威胁之一。慢性乙型肝炎是危害严重的病毒性传染病，是引起肝纤维化、肝硬化和肝癌的最主要原因。全球每年有超过50万人死于原发性肝癌，而其中多达80％的原发性肝癌是由慢性乙肝引起的。由于现有的抗病毒药物不能完全抑制、清除病毒，存在着给药剂量大、疗效低、毒副作用和易产生耐药的问题，因此，对于病毒性疾病的治疗，尤其是病毒慢性感染的治疗仍然是医学上的难题。

现有的抗病毒化疗药物，具有一般化疗药物的体内非特异性分布特点，同时受到体内生物膜吸收与转运屏障，酶代谢的影响，药物无法大量进入其分子靶标，从而导致疗效低、剂量大、毒副作用以及耐药性的产生。通过靶向制剂技术，改变以药物自身性质为主导的药物体内分布模式，将外源性的药物输送到药物作用的分子靶标，可最大限度地提高药物作用的疗效，降低药物在正常脏器的分布和毒副作用。抗HBV化疗药物的分子作用位点，除HBV吸附抑制剂外，均作用于宿主细胞内的亚细胞器，因此理想的抗HBV靶向制剂应具有高效的肝脏、肝细胞和肝细胞内的亚细胞器靶向功能。国内外的科学家，通过对药物载体大小、表面理化性质的调控、以及在此基础上的配体或抗体修饰技术，目前已经实现了药物向肝脏细胞的靶向输送，亚细胞器靶向载体技术已成为当前实现药物分子靶向治疗的核心环节。

固体脂质给药系统是20世纪90年代初发展起来的新型胶体给药系统，它是继乳剂、脂质体、聚合物纳米粒之后，极具发展潜力的靶向控释给药系统。固体脂质给药系统采用天然或合成的类脂材料，如硬脂酸、卵磷脂、单甘酯等为载体，将药物包裹于类脂核中制成固体胶粒给药系统。它既具备聚合物给药系统控释、避免药物泄漏等优点，又兼具了乳剂、脂质体的毒性低、生物相容性好、生物利用度高的优点。但是，固体脂质给药系统也存在一些潜在的局限性，如有限的载药能力、储存过程的药物排挤现象等问题。

在固体脂质中混和形态相异的液体脂质作为混合类脂基质，以此制备得到新型纳米结构脂质载体(nanostructured lipid carrier，NLC)。液体脂质的加入，可扰乱固体脂质规则的晶格结构，增加纳米粒结构中不规则晶型的比例，使承载脂溶性药物的空间容量增加，从而提高载体的载药能力。通过控制液体脂质比例，还可使NLC在体温下保持固体骨架结构，实现NLC药物的控制释放。研究发现固体脂质纳米粒和纳米结构脂质载体均具有快速的细胞摄取和细胞浆滞留特性。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种具有抗乙肝病毒活性的脂质纳米粒，所述脂质纳米粒由抗病毒药物和脂质材料组成，该脂质纳米粒负载了分子靶标位于细胞内的抗病毒药物，所述抗病毒药物包括阿德福韦酯等药物，阿德福韦酯的含量为脂质纳米粒的1％-4％。其中的脂质材料可由单硬脂酸甘油酯、棕榈酸甘油酯、硬脂酸、或单硬脂酸甘油酯和油酸等一种或两种脂质组成，其重量占纳米粒的96-99％；其中由两种脂质材料组成时，油酸占脂质材料的比例为5-20％；

本发明的另一个目的是提供该脂质纳米粒在制备抗乙肝病毒药物中的应用。该脂质纳米粒与病毒感染细胞共孵育后，与药物的溶液对照相比，可显著抑制病毒的表面抗原(HBsAg)、e抗原(HBeAg)和DNA(HBV DNA)含量，体现出良好的抗病毒疗效。

本发明的有益之处是：通过具有高效细胞摄取和细胞浆滞留功能的脂质纳米粒，对分子靶标位于细胞内的抗病毒药物的包封，可大大增加病毒细胞对药物的摄取，以及药物分子靶标部位的药物浓度。增加病毒细胞对药物的摄取，有利于减小药物在正常组织或细胞的分布，降低药物的毒副作用；而药物分子靶标部位的药物浓度的增加，有利于提高抗病毒药物的疗效。

本发明利用固体脂质纳米粒和纳米结构脂质载体均具有快速的细胞摄取和细胞浆滞留功能，负载阿德福韦酯等抗病毒药物，以提高药物分子靶标部位的药物浓度，从而达到提高该类药物的抗乙肝病毒疗效的目的。

附图说明

图1为不同药物浓度的阿德福韦酯脂质纳米粒和阿德福韦酯溶液与HepG2.2.15细胞共孵育后，对HBsAg的抑制率变化。

图2为不同药物浓度的阿德福韦酯脂质纳米粒和阿德福韦酯溶液与HepG2.2.15细胞共孵育后，对HBeAg的抑制率变化。

图3为不同药物浓度的阿德福韦酯脂质纳米粒和阿德福韦酯溶液与HepG2.2.15细胞共孵育后，对HBV-DNA表达的抑制率变化。

具体实施方式