[发明专利]一种胸腺五肽的制备方法

权利要求书

1.一种合成胸腺五肽Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-OH的方法，其特征在于进行如下步骤的反应：

(1)酪氨酸苄酯盐酸盐为起始原料，以N-甲基吗啉为催化剂，采用氯甲酸烷基酯为活化剂，活化Fmoc-Val-OH形成高活性的混合酸酐，与Tyr(Bzl)-Obzl·HCl反应，得到Fmoc-Val-Tyr(Bzl)-Obzl·HCl二肽；

(2)采用脱保护试剂将(1)中制得的二肽的氨端脱保护，得到Val-Tyr(Bzl)-Obzl·HCl二肽；

(3)以N-甲基吗啉为催化剂，采用氯甲酸烷基酯为活化剂，活化Fmoc-Asp(OBut)-OH形成高活性的混合酸酐，使(2)中制得的产物与Fmoc-Asp(OBut)-OH反应得到Fmoc-Asp(OBut)-Val-Tyr(Bzl)-Obzl·HCl三肽；

(4)采用脱保护试剂将(3)中制得的三肽的氨端脱保护，得到Asp(OBut)-Val-Tyr(Bzl)-Obzl·HCl三肽；

(5)以N-甲基吗啉为催化剂，采用氯甲酸烷基酯为活化剂，活化Fmoc-Lys(OBut)-OH形成高活性的混合酸酐，与(4)中制得的产物反应，得到Fmoc-Lys(OBut)-Asp(OBut)-Val-Tyr(Bzl)-Obzl·HCl四肽；

(6)采用脱保护试剂将(5)中制得的四肽的氨端脱保护，得到Lys(OBut)-Asp(OBut)-Val-Tyr(Bzl)-Obzl·HCl四肽；

(7)以N-甲基吗啉为催化剂，采用氯甲酸烷基酯为活化剂，活化Boc-Arg-OH·HCl形成高活性的混合酸酐，与(6)中制得的产物反应，得到保护的Boc-Arg-Lys(OBut)-Asp(OBut)-Val-Tyr(Bzl)-Obzl五肽；

(8)将(7)中制得的五肽中加入适量的TFA/H₂O/TIS＝95/2.5/2.5脱保护，得到Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-OH五肽。

2.权利要求1的方法，所述方法还包括将(8)中制得的产物经C18反相柱纯化脱盐，得到纯化产物。

3.权利要求1的方法缩合步骤采用氯甲酸乙酯或氯甲酸异丁酯为活化剂。

4.权利要求1的方法所述，其步骤(1)、(3)、(5)和(7)中混合酸酐生成过程中的反应温度为-20℃～-10℃，各肽生成反应温度为-10℃～0℃，其步骤(2)、(4)、(6)脱保护反应温度为20℃～30℃，其步骤(8)脱保护反应温度为10℃～40℃。

5.权利要求1的方法所述，其步骤(1)、(3)、(5)和(7)中混合酸酐生成过程中的反应时间为0.5～1小时，各肽生成反应为1～4小时，其步骤(2)、(4)、(6)脱保护反应时间为20分钟～40分钟。