[发明专利]一种南瓜花叶病毒长期保存方法无效
申请号: | 200810064735.5 | 申请日: | 2008-06-13 |
公开(公告)号: | CN101289656A | 公开(公告)日: | 2008-10-22 |
发明(设计)人: | 张俊华;崔崇士;刘学敏;孙洪利 | 申请(专利权)人: | 东北农业大学 |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00 |
代理公司: | 哈尔滨市哈科专利事务所有限责任公司 | 代理人: | 刘娅 |
地址: | 150030黑龙江省*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 南瓜 花叶 病毒 长期 保存 方法 | ||
1.一种南瓜花叶病毒长期保存方法,其特征在于:首先将待保存的毒源置于防虫温室内进行隔离活化繁殖,待发病后,取中位重病叶按每1g中位病叶加入5ml磷酸缓冲液的比例,加入0.02M pH 7.0磷酸缓冲液于研钵中研磨,研成浆糊状,四层纱布过滤,去滤渣,滤液经4000rpm离心30min,去渣,上清液装入玻璃管,按病毒粗提液体积加入0.8%谷氨酰胺酸钠、2%葡萄糖和2%丙三醇,冷冻干燥后密封保存。
2.根据权利要求1所述的一种南瓜花叶病毒长期保存方法,其特征在于:所述的在防虫温室内进行隔离活化繁殖步骤为:实验用具和栽培土均经高压热力消毒,取高感SqMV的南瓜种子催芽后播种,待南瓜苗长到3-4片真叶时,称取5g保存的毒源叶片放入研钵中,同时加入25ml 0.02M pH7.0磷酸缓冲液进行研磨,将叶片研磨成浆糊状,采用摩擦接种法接种后放入防虫温室中待其发病,防虫温室中白天20℃,晚上10℃。
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