[发明专利]鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列

说明书

技术领域

本发明涉及鉴别诊断口蹄疫的抗原的基因序列。

背景技术

口蹄疫(foot-and-mouth disease，以下简称FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus，以下简称FMDV)感染引起的多种偶蹄动物共患的一种急性、烈性、高度接触性、发热性传染病，以流行广、传播快、发病率高而著称。该病的发生和流行严重危害畜牧业的健康持续发展，造成巨大的经济损失，同时口蹄疫也是人畜共患病，因此世界各国相当重视对该病的研究和防制。

2003年10月9日在中国申请的申请号为200310100114.5的专利《一种口蹄疫病毒非结构蛋白基因3ABC及其制备方法与应用》公开了口蹄疫病毒3ABC的基因及利用该基因建立可鉴别口蹄疫免疫动物与野毒感染动物的诊断试剂盒。此发明专利中的检测抗原仅是初步提纯的包涵体，除重组3ABC抗原外，还含有大量杂质蛋白，在动物血清中发现大肠杆菌抗体是一个常见现象，包涵体中含有的大肠杆菌菌体蛋白会与被检血清中的大肠杆菌抗体反应，因而大肠杆菌系统表达的蛋白由于纯化问题会导致一定的假阳性检出率；又由于灭活疫苗中制备过程中可能会残留痕量3ABC抗原特别是3A抗原，可诱导机体产生抗非结构蛋白抗体，重复注射疫苗后尤为明显。在野外检测重复注射疫苗动物血清时，偶尔也能检测到非结构蛋白抗体阳性或可疑抗体。Bergman等还发现，年龄大的、重复注射疫苗的动物偶尔在EITB(酶联免疫吸附电转移测试)中出现1条或1条以上3ABC蛋白阳性反应带，因而用全长的3ABC基因转化的抗原作为包被抗原也存在混淆感染抗体和免疫抗体的可能。

发明内容

本发明是为了解决现有的口蹄疫鉴别抗原会出现非特异性反应，造成检出假阳性的问题，而提供鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列。

本发明第一种鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列长度为72bp，基因序列如SEQ ID NO.1所示。

将本发明第一种鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列命名为BF基因。

本发明第二种鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列长度为177bp，基因序列如SEQ ID NO.2所示。本发明第二种鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列是以本发明SEQ ID NO.1所示基因序列为基本单元，并以编码连接肽GGTGGTGGTGGATCC在各基本单元之间进行串联，本发明第二种鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列由2个基本单元和1个编码连接肽串联而成。

将本发明第二种鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列命名为2BF基因。

本发明第三种鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列长度为351bp，基因序列如SEQ ID NO.3所示。本发明第三种鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列是以本发明SEQ ID NO.1所示基因序列为基本单元，并以编码连接肽GGTGGTGGTGGATCC在各基本单元之间进行串联，本发明第三种鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列由4个基本单元和3个编码连接肽串联而成。

将本发明第三种鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列命名为4BF基因。

本发明第四种鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列长度为525bp，基因序列如SEQ ID NO.4所示。本发明第四种鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列是以本发明SEQ ID NO.1所示基因序列为基本单元，并以编码连接肽GGTGGTGGTGGATCC在各基本单元之间进行串联，本发明第四种鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列由6个基本单元和5个编码连接肽串联而成。

将本发明第四种鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列命名为6BF基因。

本发明第五种鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列长度为699bp，基因序列如SEQ ID NO.5所示。本发明第五种鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列是以本发明SEQ ID NO.1所示基因序列为基本单元，并以编码连接肽GGTGGTGGTGGATCC在各基本单元之间进行串联，本发明第五种鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列由8个基本单元和7个编码连接肽串联而成。

将本发明第五种鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列命名为8BF基因。

本发明的鉴别诊断口蹄疫的表位抗原的基因序列表达的蛋白具有以下优点：

1、表达的蛋白(nBF蛋白，nBF蛋白包括BF基因表达的蛋白、2BF基因表达的蛋白、4BF基因表达的蛋白、6BF基因表达的蛋白和8BF基因表达的蛋白)可检测所有易感动物的所有亚型的FMDV