[发明专利]厌氧同时还原硫酸盐和反硝化功能菌株的筛选用培养基及筛选方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种菌株的筛选用培养基。

背景技术

厌氧同时还原硫酸盐与反硝化细菌主要用于同时含有硫酸盐和硝酸盐污水的处理，现有筛选同时还原硫酸盐与反硝化细菌方法的分离周期较长，同时不易获得纯菌株，及时获得了菌株，其对硫酸盐和硝酸盐的降解效能低。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术筛选厌氧同时还原硫酸盐与反硝化功能细菌存在分离困难、分离周期长，及分离到的菌株的硫酸盐还原和反硝化降解效能低的问题，提供了一种厌氧同时还原硫酸盐和反硝化功能菌株的筛选用培养基。

本发明厌氧同时还原硫酸盐和反硝化功能菌株的筛选用培养基分液体筛选培养基和固体筛选培养基两种；每升液体筛选培养基由3.0～5.0gNa₂SO₄、1.0～3.0g KNO₃、1.0～3.0g NaNO₃、0.5～2gMgSO₄·7H₂O、0.3～0.6g K₂HPO₄、3.0～6.0g酒石酸钾钠、0.5～2g KH₂PO₄、0.1～0.5gCaCl₂·2H₂O、0.3～0.8g L-半胱氨酸和余量的蒸馏水组成，液体筛选培养基的pH值为7.5；每升固体筛选培养基是由3.0～5.0g Na₂SO₄、1.0～3.0g KNO₃、1.0～3.0g NaNO₃、0.5～2gMgSO₄·7H₂O、0.3～0.6g K₂HPO₄、3.0～6.0g酒石酸钾钠、0.5～2g KH₂PO₄、0.1～0.5gCaCl₂·2H₂O、10～15g琼脂粉、0.05～0.4mL浓度为0.2～0.4g/L的刃天青溶液、0.3～0.8g L-半胱氨酸和余量的蒸馏水组成，固体筛选培养基的pH值为7.5。

本发明的液体培养基和固体培养基均处于厌氧状态。

本发明厌氧同时具有还原硫酸盐和反硝化功能的菌株的筛选方法是按下述步骤实现的：一、分别配制如权利要求1所述的液体筛选培养基和固体筛选培养基；二、取厌氧同步去除硫氮工艺的污水或厌氧活性污泥，在厌氧条件下进行倍比稀释；三、固体培养基分离：将步骤一配制固体培养基在沸水浴中融化，然后冷却至45～55℃，迅速将步骤二稀释的污水或活性污泥用注射器注入固体培养基中，采用Hungate厌氧及“滚管”方法在冷水(10℃)中混合，然后放入恒温培养箱中在厌氧、35～38℃条件下培养，直至长出菌落；四、液体培养基富集：挑取步骤三培养的单菌落接种到步骤一配制的液体培养基，厌氧环境下培养7天～14天；五、分离纯化；六、重复步骤三至五的操作进行多次分离纯化，直至获得纯菌株；七、对步骤六得到的纯菌株性能检测，选取还原硫酸盐和反硝化功能性能优异的菌株，即完成对厌氧同时具有还原硫酸盐和反硝化功能的菌株的筛选。整个筛选过程在厌氧条件下进行。

本发明的水处理除污菌株能同时去除硫酸盐和硝酸盐，并且去除效率高，硝酸盐的去除率高达97.98％，的去除率高达96.48％。筛选用培养基的针对性强。本发明的方法简单有效、分离快速、培养周期短、工作效率高，并可筛选出目前筛选不到的污水处理性能优异的菌株的优点。

附图说明

图1是SN22-2菌单株原子力扫描电镜照片。图2是SN22-2菌多株原子力扫描电镜照片。图3是SN22-2菌对硝酸盐去除率曲线图，图中-×-表示SN22-2菌对的去除率曲线，-●-表示培养基中的浓度曲线，-▲-表示培养基中的浓度曲线。图4是SN22-2菌对的去除率曲线图，图中-×-表示SN22-2菌对的去除率曲线，-★-表示培养基中的浓度曲线。图5是基于SN22-2菌株和相近的菌株16S rDNA序列构建的NJ系统发育树。

具体实施方式