[发明专利]卵泡刺激素受体B细胞表位及包含此表位的抗原肽

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及卵泡刺激素受体B细胞表位及包含此表位的抗原肽。

背景技术

人口爆炸和非计划妊娠一直是世界范围的公共卫生问题。尽管现行有多种避孕方法，但都有其局限性，如男性避孕只能使用避孕套或进行输精管结扎手术，前者失败率较高，后者具有不可逆性，且可能产生意料不到的严重免疫学后果。因此，开发一种高效、安全、作用持久、可逆、价廉的避孕方法成为迫切需要。

卵泡刺激素(FSH)是人体内最重要的生殖激素之一，其对男性生殖功能的调节作用通过仅表达于睾丸支持细胞(Sertoli cell)膜表面的特异性受体即卵泡刺激素受体(follicle-stimulating hormone receptor，FSHR)介导。抗FSHR抗体与FSHR结合后，可抑制或阻断FSHR与FSH的特异性结合，从而使FSH的生物学作用下降或消失，造成免疫性不育。1997年，Moudgal等用绵羊FSHR免疫雄猴成功导致不育，表明FSHR可作为潜在的有效的男性避孕疫苗。但以天然蛋白为抗原的避孕效果不理想，避孕率仅为70％左右，无法满足临床的避孕标准，且未能克服采用天然蛋白抗原所带来的共同问题，如免疫耐受等。

蛋白质抗原通过表位体现其免疫特异性。就某一蛋白质抗原而言，它不仅含有B细胞表位、T辅助细胞(Th)表位、细胞毒性T细胞(CTL)表位、自然杀伤细胞(NK)表位、主要组织相容性复合物(MHC)限制位等与免疫识别密切相关的结构，同时还含有毒性表位、抑制性表位、交叉反应性表位等不良表位，这些不良表位可引起免疫偏移、免疫颠覆等不利的免疫反应而导致免疫耐受。因此，为了提高蛋白质抗原的保护性，须在表位水平上做出选择，摒除后者，保留或改善前者以得到更理想的疫苗分子。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供FSHR的B细胞表位，具有SEQ ID No.1所示氨基酸序列。

本发明的目的之二在于提供包含所述FSHR的B细胞表位的抗原肽，由T辅助细胞表位与FSHR的B细胞表位串联而成；所述T细胞表位具有SEQ ID No.2所示氨基酸序列。

进一步，T辅助细胞表位通过柔性接头与FSHR的B细胞表位串联；

进一步，所述柔性接头选自由GGG、GGS或KK组成的短肽。

本发明的目的之三在于提供包含免疫学有效量的所述包含FSHR的B细胞表位的抗原肽的组合物。

进一步，还包含药学上可接受的载体；

进一步，所述免疫学有效量为每剂每千克体重2-5毫克。

本发明的目的之四在于提供能够与所述FSHR的B细胞表位特异性结合的抗体

本发明的目的之五在于提供能够与所述包含FSHR的B细胞表位的抗原肽特异性结合的抗体。

本发明的目的之六在于提供所述包含FSHR的B细胞表位的抗原肽在制备男性避孕疫苗中的应用。

本发明的有益效果在于：本发明公开了FSHR的优势B细胞表位，具有SEQ IDNo.1所示氨基酸序列，其成分单一、结构简单、摆脱了天然蛋白抗原中不良表位的影响，引发的免疫反应针对性强；本发明还公开了包含此优势B细胞表位的抗原肽，由麻疹病毒融合蛋白的T辅助细胞表位与此优势B细胞表位串联而成；此抗原肽中的T辅助细胞表位能刺激机体产生CD4+T细胞，从而辅助B细胞活化，使其分泌高滴度的特异地靶向所述优势B细胞表位的抗体，诱导高效、安全、可逆的抗生育作用，可用于制备男性避孕疫苗，为男性避孕的临床主动免疫治疗提供新的手段，具有重要的理论价值和广阔的应用前景，能够产生重大的社会效益和经济效益。

附图说明

为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明作进一步的详细描述，其中：

图1为本发明抗原肽的HPLC鉴定图；

图2为本发明抗原肽的MS鉴定图；

图3为本发明抗原肽免疫雄鼠血清中特异性抗体生成曲线；

图4为本发明抗原肽免疫雄鼠血清与人睾丸组织总蛋白提取液的ELISA反应结果；

图5为本发明抗原肽首次免疫雄鼠后第7周雌雄小鼠合笼实验中雌鼠的产仔情况；

图6为本发明抗原肽首次免疫雄鼠后第26周雌雄小鼠合笼实验中雌鼠的产仔情况。

具体实施方式