[发明专利]酵母转化与树脂吸附耦合制备2－苯乙醇的方法

权利要求书

1.一种酵母转化与树脂吸附耦合制备2-苯乙醇的方法，其特征在于：采用酵母为生物催化 剂，以L-苯丙氨酸为底物，以树脂为产物分离介质，通气搅拌转化，并通过控制葡萄糖 流加速率抑制乙醇的生成，控制转化温度25～36℃，pH4～7，转化10～100h，转化液及树 脂经后处理制得天然2-苯乙醇；其制备步骤为：

(1)酵母培养：酵母经过接种、斜面活化后进行种子扩大培养成二级种子液；

(2)生物转化：将二级种子液接种至转化培养基，通气搅拌，控制溶氧大于0.5mg/L， 温度25～36℃，用酸碱控制pH4～7，2小时后，加入L-苯丙氨酸至浓度1～20g/L， 并以合适的速率流加葡萄糖，使转化溶液中的葡萄糖的浓度控制在0.01～20.0g/L； 所述转化培养基组成为：葡萄糖20～40g/L，KH₂PO₄1g/L，尿素2～4g/L，MgSO₄0.3～0.5g/L，CaCl₂0.2g/L，溶剂为水，pH自然；

(3)产物原位转移：酵母培养过程中加入大孔树脂，加入量为50～300g/L发酵液；或者 将树脂装填成柱，通过泵将发酵液打入树脂柱并将流出液再接入发酵罐形成循环； 或者将发酵液先经膜分离装置分离菌体及固形物后，将滤过液上柱，过柱液全部或 部分返回发酵罐形成循环；当树脂吸附饱和后可更换新树脂；溶氧浓度、pH及补糖 速率等控制条件同(2)；在转化过程可适当补加L-苯丙氨酸；转化10～100h停止；

(4)树脂后处理：从发酵液中取出树脂，装填成柱，用一定浓度乙醇动态洗脱，收集2- 苯乙醇洗脱峰，再通过精馏制得高纯度天然2-苯乙醇。

2.根据权利要求1所述的酵母转化与树脂吸附耦合制备2-苯乙醇的方法，其特征在于：所 述酵母采用具有艾氏途径的酵母。

3.根据权利要求1所述的酵母转化与树脂吸附耦合制备2-苯乙醇的方法，其特征在于：所 述酵母采用酿酒酵母、酸酒酵母、产朊球拟酵母、乳酸克鲁维酵母、异常汉逊酵母、马 克斯克鲁维酵母或发酵毕赤酵母中的一种。

4.根据权利要求1所述的酵母转化与树脂吸附耦合制备2-苯乙醇的方法，其特征在于：所 述树脂为大孔吸附树脂；所述大孔吸附树脂的用量与发酵液用量比为10～300g∶1L。

5.根据权利要求1所述的酵母转化与树脂吸附耦合制备2-苯乙醇的方法，其特征在于：所 述步骤(3)中膜分离采用孔径0.1-1.2μm的中空纤维膜或陶瓷膜。

6.根据权利要求1所述的酵母转化与树脂吸附耦合制备2-苯乙醇的方法，其特征在于：所 述步骤(4)的树脂后处理的条件为：用30～100％(v/v)乙醇洗脱树脂，收集苯乙醇洗脱 峰，然后再精馏得到高纯度苯乙醇。