[发明专利]辅酶Q10清洁纯化工艺

说明书

技术领域

本发明属于生化技术领域，更具体涉及一种辅酶Q₁₀清洁纯化工艺。

背景技术

辅酶Q₁₀(Coenzyme Q₁₀简称CoQ₁₀)是一种代谢激活剂，能激活细胞呼吸，加速产生三磷酸腺苷(ATP)，并起到解毒急救作用；可改变细胞和组织的缺氧状态，对肝、脑、心脏及神经系统均有较好的保护和改善作用；它还有增强体内的非特异性免疫力。辅酶Q₁₀是细胞自身产生的天然抗氧剂，能抑制线粒体的过氧化，保护生物膜结构的完整性，对免疫力有非常特殊的增强作用，能提高吞噬细胞的吞噬率，增强抗体的产生，改善T细胞功能，其结构如下：

辅酶Q₁₀的制备方法主要分为3种：生物提取法、微生物发酵法和化学合成法。生物提取法是最传统的生产工艺，该方法生产的是侧链双键几何构型全反式的天然产品，易被人体吸收，产品纯度较高，质量较好；但是由于生物体内辅酶Q₁₀含量低，各种化学成分复杂，并受原料来源限制，因此该方法生产成本高、产品价格昂贵，规模化生产受到限制，在现代工业生产上已被逐渐淘汰。现阶段辅酶Q₁₀的制备基本采用茄尼醇半合成法以及微生物发酵法。但是半合成法和微生物发酵法在后期提纯、开发高精度分离装置与技术等方面尚存在一些问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种辅酶Q₁₀清洁纯化工艺，该工艺操作简单，成本低廉，得到的辅酶Q₁₀纯度高、质量好，具有显著的经济效益，适合大规模推广应用。

本发明的辅酶Q₁₀清洁纯化工艺：将辅酶Q₁₀用有机溶剂溶解，应用高效液相制备柱或中压硅胶填充柱或大孔树脂柱，以洗脱剂洗脱，根据谱图或薄层色谱法分析，分段收集，获得高纯度的辅酶Q₁₀产品。

本发明的显著优点是：本发明的工艺操作简单，成本低廉，得到的辅酶Q₁₀纯度高，最高纯度可达99.5％、质量好，具有显著的经济效益，适合大规模推广应用。

附图说明

图1是含量99.5％辅酶Q₁₀HPLC谱图

具体实施方式

辅酶Q₁₀用有机溶剂溶解，应用高效液相制备柱或中压硅胶填充柱或大孔树脂柱，以洗脱剂洗脱，根据谱图或薄层色谱法分析，分段收集，获得高纯度的辅酶Q₁₀产品。

采用的辅酶Q₁₀原料纯度为30％～85％。

所述有机溶剂为氯仿、丙酮、苯、正己烷或石油醚中的一种，溶解至完全即可。所述洗脱剂为乙酸酯和氯仿或石油醚或正己烷的混合溶液；混合溶液洗脱剂中乙酸酯与氯仿或石油醚或正己烷的体积比为1∶5～25，所述乙酸酯为乙酸甲酯或乙酸乙酯；洗脱剂洗脱速度根据谱图或薄层色谱法分析，先快后慢，检测到辅酶Q₁₀成份后洗脱速度放慢，洗脱至检测无辅酶Q₁₀成份后结束。

所述高效液相制备柱的树脂或中压硅胶填充柱或大孔树脂柱的硅胶与辅酶Q₁₀质量比为：5～20∶1。

所述装柱的硅胶经200～300℃高温活化后重复使用10～200次。

所述的薄层色谱法采用的展开剂为苯、甲醇、乙醇、氯仿或石油醚中的一种或几种。

所述高纯度的辅酶Q₁₀产品进一步重结晶纯化成更高纯度的产品；所述重结晶所用溶剂是甲醇、乙醇、丙三醇、丙酮或乙醚中的一种或几种的混合液。

以下是本发明的几个具体实施例，进一步说明本发明，但是本发明不仅限于此。

实施例1

取10g含量85％辅酶Q₁₀，用正己烷溶解完全后，过高效液相制备柱，采用体积比15∶1的正己烷—乙酸乙酯混合溶液作为洗脱剂，根据谱图分段收集，开始流速为10ml/min，至检测有辅酶Q₁₀成份后，流速控制为5ml/min，浓度高的浓缩后得到高纯度辅酶Q₁₀，最高纯度可达99.5％。

实施例2