[发明专利]一种产麻黄碱的细菌及其生产的麻黄碱

说明书

发明领域

本发明涉及微生物资源领域。具体的说，本发明涉及一种产生麻黄碱的细菌菌株及其代谢产物领域。

背景技术

麻黄碱也称麻黄素，其化学名称是1-苯基-2-甲氨基丙醇，共有4种旋光异构体。其中主要的是l-麻黄碱和d-伪麻黄碱。l-麻黄碱属于拟肾上腺激动药，主要用于治疗支气管哮喘、各种咳嗽、过敏反应、低血压等症，还具有松弛平滑肌，收缩血管，加速心率，升高血压及中枢神经兴奋作用。d-伪麻黄碱为拟交感神经药，具有上呼吸道粘膜血管收缩作用、升压作用、并具有显著的利尿作用。还具有抗炎作用。

在医药上，国内临床麻黄碱和伪麻黄碱的治疗感冒的复方药物有：白加黑、联邦伤风素、银得菲、泰诺感冒片、布洛伪麻胶囊等。治疗由感冒引起的鼻塞，鼻粘膜充血，咳嗽等症状。如复方盐酸伪麻黄碱片，复方盐酸伪麻黄碱口服溶液等。治疗咳嗽的中成药有：定喘宁胶囊、小儿止咳糖浆等；治疗鼻炎的药物有氯雷他定硫酸伪麻黄碱缓释片；羟苄羟麻黄碱在临床用于治疗月经不调以及先兆性流产和早产。在欧美国家，含有麻黄素的药物达300余种，其中含有盐酸伪麻黄碱的抗感冒药物就达200多种。另外国外有将麻黄碱做为食品添加剂，兴奋中枢并抑制肠蠕动以控制体重的，主要用于节食、减肥。

对麻黄碱的生产，国内主要采用植物提取法，直接从麻黄草中提取麻黄碱。这种传统工艺工序繁琐，劳动强度大；生产成本高，直接依赖麻黄草资源，产量小且不稳定。此外，麻黄碱的生产也有直接化学合成的报道(孙同庆，石鸿昌.dl-麻黄碱和dl-伪麻黄碱的合成〔J〕。中国医药工业杂志2000.31(12)：534)。但是产生的是l-麻黄碱和d-伪麻黄碱的外消旋体，需要进一步拆分，成本较高。利用生物转化法生产麻黄碱有许多优势，国内外报道一种半生物转化生产麻黄碱(石贵阳、董世建.d-伪麻黄碱转化菌株的筛选〔J〕.药物生物技术.2003，10(6)：377～38)(董世建、石贵阳.微生物转化法生产d-伪麻黄碱.无锡轻工大学学报.2004年3月：5～7)的方法是：先用丙酮酸脱羧酶将苯甲醛转化为苯基乙酰基甲醇(R-PAC)，再进一步合成麻黄碱。而利用微生物直接生物转化法生产麻黄碱国内外还未见公开报道。

发明内容

针对我国有关直接微生物转化法生产天然麻黄碱的研究工作刚刚开展，尚未有相关研究公开报导。本发明作者通过对麻黄内生菌筛选得到发酵法生产麻黄碱的原始菌株，旨在探索出一条利用生物技术、直接微生物转化法生产天然麻黄碱的新途径。

本发明提供的一株生产天然麻黄碱的菌株，通过在新疆巴音郭楞蒙古自治州地区和硕县万香庄园的人工种植中麻黄(Ephedra intermedia Schrenketc.A.Mey)的采集样本分离、筛选和培养，获得一批具有生产天然麻黄碱的菌株，从中筛选出一株编号为D16B2的菌株，具有稳定生产天然麻黄碱效果，经微生物学分类与鉴定，属于鲁氏不动杆菌(Acinetobacter lwoffii)。

本发明提供了一种产生麻黄碱的微生物菌种及其代谢产物麻黄碱。

本发明具体提供的一种产麻黄碱的菌株，命名为D16B2，能够产生稳定的麻黄碱。该菌株已于申请日前保藏于布达佩斯条约微生物国际保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)。地址：北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所，邮编：100101。保藏日期是2008年01月07日，保藏号是CGMCC.No 2323。经微生物学鉴定为鲁氏不动杆菌(Acinetobacter lwoffii)。该菌株细胞呈杆状、革兰氏阴性、无芽孢，菌落表面湿润、透明、光滑、粘稠、易挑起、质地均匀、菌落正反面或边缘与中央部位颜色一致，菌落较小、较厚、边缘较整齐。氧化酶阴性、严格好氧、在20～30℃生长，可在所有普通综合培养基上均能生长。依照第九版《伯杰氏系统细菌学鉴定手册》(《Bergey，s Manual of SystematicBacterio-logy》)和《常用细菌系统鉴定手册》对D16B2菌株进行形态学测定，生理生化检测确定D16B2菌株为不动菌属中的成员，定为鲁氏不动杆菌(Acinetobacter lwoffii)。经16SrDNA同源分析、系统发育分析结果都表明D16B2菌株属鲁氏不动杆菌(Acinetobacter lwoffii)。