[发明专利]一种引起番茄酱腐败的枯草芽孢杆菌

说明书

发明领域

本发明涉及微生物菌种及在检测食品微生物中的应用领域，特别是涉及到微生物菌株及其在检测番茄酱腐败中的领域。

背景技术

袋装或罐装番茄酱中由于不同原因造成微生物的污染，生存的微生物许多可利用番茄酱中的一些营养物质造成产品的腐败。在对引起番茄酱腐败微生物的研究中，芽孢杆菌占50％，其中枯草芽孢杆菌为主要的种类。针对由枯草芽孢杆菌引起番茄酱腐败方面的研究工作在中国仍是一片空白。

番茄酱属酸性罐头食品(pH4.5以下)，在其中存活的微生物多为耐酸、抗热性极强的杆菌、球菌等，它们的存在常常会导致罐头食品的腐败。国外有文献报道，尼日利亚乳酸菌是番茄酱中的优势微生物，但是近年报道，世界各地番茄酱中的优势微生物并不是尼日利亚乳酸菌，其缺乏相应科学数据支持。而经过大量试验研究表明，经新疆进出口的番茄酱其微生物的种群构成与国外报道不相同。番茄酱中的微生物种类很丰富，近6年对新疆进出口番茄酱中微生物研究中分离出的芽孢杆菌占50％，葡萄球菌占25％，其它杆菌占15％，酵母菌占3％，乳酸菌占2％及霉菌占1％，大肠菌群、厌氧菌等占4％。数据表明芽孢杆菌为优势菌群。而当前国内外还没有报道由枯草芽孢杆菌引起番茄酱腐败方面的研究内容。

对枯草芽孢杆菌的研究国内外报道很多，主要涉及到其代谢产物方面的研究，但作为检测引起番茄酱产品腐败变质的一种目标菌未见有所报道。

发明内容

针对目前导致番茄酱腐败的枯草芽孢杆菌的检测未见有所报道。近几年，一些国家和地区对进出口番茄酱要求检测造成产品腐败的主要微生物项目，要求能够建立起检测番茄酱枯草芽孢杆菌。枯草芽孢杆菌作为主要引起番茄酱腐败的微生物，对其研究现在仍为空白。

本发明从新疆生产的变质的番茄酱中取样，筛选出一株具有一定耐热性的芽孢杆菌(xjtp001)，经鉴定为枯草芽孢杆菌，该菌株能导致番茄腐败，是目前检测番茄腐败菌中主要菌株。

本发明根据番茄酱产品腐败现象，从变质的番茄酱中进行微生物菌种的培养、分离与筛选，获得一批菌，并从中分离筛选出xjtp001，编号为CCTCC NO.M208140，从而提供了一株能引起番茄酱产品腐败的细菌，经微生物学分类与鉴定，属于枯草芽孢杆菌属、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。

本发明具体提供了xjtp001细菌，命名为枯草芽孢杆菌，其能够有效导致番茄酱产品腐败变质。参照《伯杰氏系统细菌学鉴定手册》(《Bergey，s Manual of Systematic Bacterio-logy》)第九版和《常用细菌系统鉴定手册》等对该xjtp001菌株进行形态学测定，生理生化检测、分子生物学鉴定。xjtp001菌株已于申请日前保藏于布达佩斯条约微生物国际保藏单位：中国典型培养物保藏中心(CCTCC)。地址：湖北省武汉市武昌珞珈山，邮编：430072。保藏日期是2008年10月5日，保藏号是CCTCC.No.M208140。经微生物学鉴定为枯草芽孢杆菌xjtp001(Bacillus subtilis xjtp001)。优先生长于平酸菌增菌培养基表面(培养基组分[g/1000ml]为：胰蛋白胨5.0g、酵母浸膏5.0g、葡萄糖5.0g、可溶性淀粉2.0g、磷酸氢二钾4.0g、1％溴甲酚紫酒精溶液1mL、蒸馏水1000mL)35℃～37℃下培养24小时的菌落细胞呈圆形、表面皱褶、呈乳白色、不透明、菌落大小在1.90×2.20mm左右。菌体经革兰氏染色染色为革兰氏阳性杆菌、有芽孢，且中生，培养温度35℃～37℃，PH为7.0～7.2，耐盐浓度为12％NaCL，能水解淀粉、溶解明胶、还原硝酸盐、过氧化氢酶阳性、V-P测定阳性、MP试验阴性、能利用多种糖。菌株为芽孢杆菌属(Bacillus)中的成员。通过全自动微生物鉴定系统VITEK-32分析、16SrRNA同源分析。表明xjtp001菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，以下简称枯草芽孢杆菌。