[发明专利]结核及耐药结核的个性化卵黄多克隆抗体制剂及其制备方法与应用

说明书

技术领域：

本发明涉及治疗、预防结核及耐药结核病生物新药以及检测结核及耐药结核病新试剂的开发，特别是结核及耐药结核的个性化卵黄多克隆抗体制剂及其制备方法与应用。

背景技术：

结核病是严重危及全球公共卫生的传染病之一。据WHO估计，目前全球约有20亿人受结核杆菌感染，其中约有5000万人感染了耐药结核杆菌。1994～1997年，WHO/IUATLD(国际防痨和肺病联合会)在35个国家和地区统计：初始耐药率为9.9％，获得性耐药率为5.3％～100％，耐多药率为0～54％，因此，全球的结核病耐药趋势严峻。我国是“结核大国”，有5.5亿人口感染过结核菌，有结核患者500万，占全球结核病人总数的25％。全球每年新出现耐多药结核病(MDR-TB)患者约30万，世界卫生组织估算，中国耐多药结核病患者数占全球的25％～33％，属高耐药国家。耐药、流动人口和爱滋病毒HIV感染已经成为当今结核病控制所面临的三大难题，其中耐药性是对我国结核病控制起主要限制性作用的因素。

结核病易产生耐药性，其中重要原因是结核杆菌是一种非常容易发生变异以致产生耐药性的细菌。1944年链霉素开始用于结核病治疗，很快就产生了耐药菌株。1948年氨硫脲投入抗结核病治疗，与对氨水杨酸合用，抗痨效果很好。但是，没过多久，结核杆菌也对它们产生了耐药。1952年异烟肼投入临床，3种药物联用，治疗效果更好。但仅仅过了3年时间，到了1955年，人们发现结核杆菌又产生了耐药，而且是耐多药。1972年研制出利福平，利福平的出现，打破了结核病化疗的难点，缩短了疗程。但没过多久，同样也出现了耐药现象。可以说，一种新的抗结核西药上阵没多久，就对结核杆菌失去了威力；哪儿搞抗结核治疗，哪儿就产生耐药结核病。对于结核杆菌这种特殊的耐药本领，人类真有些束手无策。而近40年来，没有抗结核的新药问世。

在治疗结核时，如果病人感染的是敏感性结核杆菌，用异烟肼、利福平、链霉素、二己胺丁醇、吡嗪酰胺这些一线药物的标准疗程进行治疗就能够控制。如果结核杆菌同时对异烟肼和利福平等二种以上一线药物产生抗药性，就被认为是耐多药结核。对抗耐多药结核，通常用二线药物组合治疗耐多药结核，所需时间更长，更加昂贵，并且产生更多副作用。在这些二线药物也被滥用或管理不当，并因此也变得无效时，可发展为广泛耐药结核(XDR-TB)，该病菌就连很少用的药物也能抵抗，达到无药可治的地步。如果一个人被广泛耐药结核患者传染，被传染的人很可能直接就变成了一个新的广泛耐药结核病人，而不是普通的结核病人，也就是说，从他第一天得病开始，多数药物就对他毫无效果了。由此可见，目前西药治疗结核存在四大缺陷：①疗程长，初治至少9个月，复治至少1年半。②治疗费用昂贵，且难以治愈。③有较大毒副作用，治疗此病要联合用药，毒副作用也增大。④进一步加剧多重耐药菌产生。

此外，由于结核病患者的机体保护性免疫处于劣势，单纯、有效的化疗仍然不能杀灭持留菌。因此，即使在药物治疗有效的同时也必须采用免疫疗法，恢复患者机体的保护性免疫。由此看来，发展没有抗药性的生物医药，采取免疫治疗，是防治结核，尤其是耐药结核的有效途径。结核杆菌变异性大、多型性十分突出，目前尚无一种针对结核病患者个性化的抗体被动免疫治疗的策略。

卵黄IgY抗体，是将一些抗原物质注射到雌禽的体内，然后再从免疫雌禽所生的卵蛋中提取针对抗原的特异性抗体，用于诊断和治疗疾病。卵黄抗体在兽医临床上已得到应用，但至今，仍没有一种卵黄抗体制品在人的结核及耐药结核的临床治疗和检测中使用。

发明内容：

本发明的目的是要提供一种安全、可靠、经济简便、易于推广、无交叉耐药性、适用面广的针对结核及耐药结核个性化的卵黄多克隆IgY抗体制剂及其制备方法与应用。

本发明提供了一种结核及耐药结核个性化卵黄多克隆IgY抗体制剂，它由从结核患者的血清或痰中分离、培养出致病菌，0.4％甲醛灭活，制成针对该患者及针对该致病结核杆菌的个性化疫苗，注射到健康的雌禽的体内，经此个性化免疫后，从雌禽所产的卵黄中提取结核或耐药结核特异性多克隆IgY抗体，经除菌、提取、纯化、脂质体微囊化等工艺制成得到针对结核或耐药结核杆菌的个性化的特异性多克隆IgY抗体制剂。该制剂用于治疗结核或耐药性结核杆菌引起相关疾病的药物或保健品中，并可应用于高危人群预防结核或耐药性结核杆菌的感染，亦可用于结核或耐药性结核杆菌引起的相关疾病的个性化的快速检测。

本发明提供了一种个性化结核或耐药性结核病卵黄多克隆IgY抗体制剂的制备方法，该方法包括如下步骤：

1.个性化的免疫：