[发明专利]萘醌类化合物的应用

说明书

技术领域

本发明属中药有效成分的用途，主要涉及萘醌类化合物在制备抗多药耐药肿瘤作用药物中的应用。

背景技术

紫草在我国大部分省区均有分布，它有消炎、收敛和解热作用，药用其根，已应用于临床，疗效确切。紫草最初记载于《神农本草经》，为防治麻疹的中药。而紫草素则是抗炎症的主要成分。紫草富含紫草素及其衍生物，其含量占3～6.5％，颜色深红，化学结构为萘醌类，在生物体内的氧化还原反应中能传递介子。具有止血、抗炎、抗菌、抗病毒及抗癌的药理活性。紫草的多种成分及其结构决定了其功能的广谱性和用途的多样化，可成为多种行业天然系列产品的中间体原料。

紫草虽然被报道具有抗肿瘤的作用，然而，并没有报道说明紫草具有治疗耐药肿瘤的功能。本发明说明紫草所含的萘醌类化合物具有独特的治疗多药耐药耐药肿瘤的功能。

多药耐药是指肿瘤细胞对不同结构和作用机理的药物产生交叉耐受性，肿瘤细胞对多种化疗药物产生交叉耐药是成为化疗成功的障碍。据不完全统计，90％以上的患者死因与多药耐药(MDR)有关。

多药耐药的原因有很多，例如：

1.MDR1基因及其编码产物P-糖蛋白(P-gp)过度表达

1976年juliano^[14]用中国仓鼠卵巢细胞(CHO)使其对秋水仙碱耐药，首先揭示了MDR与细胞内药物浓度降低有关，并证实MDR细胞内存在一种能量依赖性膜转运蛋白，其相对分子质量为(1.5-1.8)×10⁸，它由Mdr-1基因编码。人类Mdr-1基因位于第7对染色体，在人类正常组织中有不同程度表达。其中在肺，胃肠中有中等程度的表达。P-gp作为一种ATP酶活性的跨膜泵或“换位酶”，将摄入细胞内的药物泵出，促使其外流而维持细胞内化疗药物的低浓度水平。因此P-gp的过度表达与肿瘤细胞的固有耐药性有关。

此外，进一步的研究发现，P-gp在细胞凋亡中可能发挥重要的调控作用。报告抑制caspase活化，改变细胞内PH，抑制质膜去极化和K⁺外流，减少神经酰胺生成等等，造成细胞的调亡耐受，从而表现出耐药。

2.多药耐药相关蛋白(MRP)过度表达

MRP是于1992年由Cole等人在用对阿霉素选择耐药的肺癌细胞株H69AR中发现的第二个与多药耐药有关的ABC转运蛋白。它是一个分子量为190kDa，包含1531个氨基酸残基的膜蛋白，与Pgp仅有15％的同源性。后来又有八个MRP同源蛋白报道，分别命名为MRP 2～9，而最早发现的则称为MRP1。这些MRP蛋白均属于ABC家族中的C亚族，其中MRP1～6与多药耐药有过关，其它几个蛋白的功能至今还不明确。

在MRP家族中MRP1是研究的最多的一种，编码该蛋白的MRP1基因位于染色体的16p13.1。MRP1的功能和作用方式同PgP相似，也是作为一种ATP能量依赖泵，通过外排降低药物在胞内的积聚浓度来达到耐药效果。不同的是它的功能的发挥必须借助于胞内的谷胱甘肽(GSH)，是一种GSH结合物转运蛋白(即所谓的GS-X泵)。

与PgP的主要底物是疏水阳离子不同，MRP1的底物主要的是有机阴离子，并且主要以GSH、葡糖醛酰胺以及硫酸盐结合物的形式转运。但MRP1转运的底物也有许多是与PgP重叠的，但两者也有一些不同点，如MRP1表达的耐药细胞与PgP表达的相比，它对紫杉醇基本上不产生交叉耐药。

3.乳腺癌耐药蛋白(BCRP)过度表达

1990年Chen等用阿霉素(adriamycin，Adr)加维拉帕米(verapamil，Vp)从人乳腺癌细胞株MCF-7诱导得到一株MDR细胞MCF-7/AdrVp。该细胞株对抗肿瘤药物均能产生交叉耐药，后证实MCF-7/AdrVp细胞株无P-gp、MRP的过度表达。1998年Doyle等用RNA指纹分布技术研究发现在乳腺癌耐药细胞MCF-7/AdrVp中有一比亲本细胞MCF-7过度表达的大小为2.4kb mRNA分子，该mRNA编码一个由663个氨基酸残基组成的跨膜转运蛋白。因该蛋白首先在乳腺癌细胞中发现，故命名为乳腺癌耐药蛋白(BCRP)。人的BCRP基因位于4q22，其cDNA长度为2.4kb，编码的蛋白质由663个氨基酸组成，其分子量约为72.6kD。